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吉妮欧类风湿性关节炎动物模型背景的建立模型详细介绍

  • 分类:企业动态
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  • 来源:专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)
  • 发布时间:2022-03-07 14:07
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【概要描述】类风湿性关节炎动物模型的建立,其基本病理改变是滑膜炎,急性期滑膜肿胀、渗出,中性粒细胞浸润;慢性期滑膜增生肥厚,形成血管翳;后者是造成关节破坏、关节畸形、功能障碍、使疾病进入不可逆阶段的病理基础

吉妮欧类风湿性关节炎动物模型背景的建立模型详细介绍

【概要描述】类风湿性关节炎动物模型的建立,其基本病理改变是滑膜炎,急性期滑膜肿胀、渗出,中性粒细胞浸润;慢性期滑膜增生肥厚,形成血管翳;后者是造成关节破坏、关节畸形、功能障碍、使疾病进入不可逆阶段的病理基础

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  类风湿性关节炎动物模型的建立
  类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎、破坏性关节病变为主要特征的慢性、自身免疫性疾病,致畸、致残率极高。(推荐阅读:类风湿性关节炎(RA)模型MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞HFLS-RA人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
  其临床症状主要表现为全身关节肿胀、疼痛和运动失调等、病情及其严重的甚至可能导致残疾。
  其基本病理改变是滑膜炎,急性期滑膜肿胀、渗出,中性粒细胞浸润;慢性期滑膜增生肥厚,形成血管翳;后者是造成关节破坏、关节畸形、功能障碍、使疾病进入不可逆阶段的病理基础。


  发病机制
  RA 是一种复杂的免疫性疾病,致病机理目前还没有完全了解。
  目前多认为本病属于一种自身免疫性疾病,其始动因子尚不清楚,可能是感染因子(如病毒、支原体或细菌等)进入人体后,其所含某些成分(如寡糖或糖肽碎片)被关节内滑膜细胞摄取并组合到滑膜细胞所合成的蛋白多糖中,使其结构发生改变而具抗原性。
  此外还和遗传因素有关,已发现 RA 的易感基因。
  目的
  为探明类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的病因、病理学、免疫学、临床等方面的机制,寻找更有效的治疗 RA 的方案。
  因此探寻一种与人类 RA 相似、容易建立、比较经济的并且能全面反映 RA 特点的动物模型是一种必要的手段


  (一)佐剂诱导型(Adjuvant Arthritis, AA)(推荐阅读:佐剂性诱导节炎(AIA)啮齿动物模型
  AA 最早由细菌学家Freund 于20 世纪50 年代创立,又称为弗氏佐剂关节炎。通常用完全弗氏佐剂(CFA)作介导溶剂。
  其机制是结核杆菌致关节炎抗原为 65 kD 热休克蛋白(HSP),RA病人软骨内具有与 65kD HSP 相似的蛋白多糖桥联蛋白抗原成分,CFA 注入激活T细胞,激活T细胞参与 RA 发病机制。


  (二)胶原诱导型(collagen-induced arthritis,CIA)(推荐阅读:胶原诱导关节炎(CIA)啮齿动物模型
  CIA 模型是由Trentham等于1977年首次建立的实验性关节炎动物模型。
  Ⅱ型胶原蛋白与完全弗氏佐剂(CFA)混合至完全乳化,制备Ⅱ型胶原乳剂对动物进行免疫。
  其建模机制是 50%的RA患者血清中存在有抗CⅡ的自身抗体,表明CⅡ可诱导体内产生关节炎性质的自身免疫反应。


  (三)胶原抗体诱导型(CAIA)
  抗Ⅱ型胶原单克隆抗体源自8周大的雄性DBA/1J 小鼠CIA 模型,这些抗体混合物注射到模型小鼠的关节腔后可直接作用于Ⅱ型胶原或其他在体内高表达的自身抗原,从而发挥免疫介导作用。
  该模型的临床症状与CIA和RA很相似,突出特点是能在几天之内迅速发病,关节组织中巨噬细胞和多核型白细胞浸润。该模型很好的体现了外源性抗原抗体刺激体诱导的严重关节损伤。


  Ⅱ型胶原乳剂制备
  用高速匀浆机机器搅拌按照佐剂和胶原溶液(1:1),加入顺序是把水溶液加到油溶液中去,搅拌中逐滴加入。
  模型构建成功展示
  总结
  为减少震荡过程中发热导致的胶原变性,可在管子外面再套一个装有有冰水混合物的管子。搅拌时间为2min左右。
  胶原佐剂剂配成乳剂后一定要检测乳剂的质量,乳化后的胶原滴入水中不扩散才能进行免疫,如果滴入水中扩散说明乳化效果不好,影响造模效果。乳剂现配现用,乳剂保存时间不超过1小时。


  足垫免疫
  针头应插入足垫皮下指向脚踝方向:这样能够保证佐剂引流到淋巴结。30min内会看到严重的急性炎症反应,高峰期3-4天,通常情况下回持续20-25天。
  免疫的后爪不能作为评分标准,因为即使其四肢都没有肿胀,免疫的后爪也会发生肿胀。
  免疫后12-14天在未注射的爪子发生肿胀,高峰期2-3天,关节炎会持续20-25天。但是有一些大鼠会反生由骨膜反应引起的慢性骨性肥大。


  尾根部免疫
  2mg/ml的鸡II型胶原与含5mg/ml灭活结核杆菌完全弗式佐剂1:1乳化后,200ul尾根部皮内注射,21天后改用2mg/ml的鸡II型胶原与不完全弗式佐剂1:1乳化后尾根部皮内第二次注射100ul


  模型构建成功展示


  为进一步研究类风湿关节炎,建立可靠的模型是研究的关键,现在的RA模型
  并不能全面的反应人类的临床症状,存在一定的差异性,现存的模型中胶原
  诱导性模型和佐剂性模型相对可靠一些,有待于进一步的探讨。

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