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研究肝组织慢性乙型肝炎肝内ccDNA关系 探讨ccCDNA在CHB诊断和治疗中的重要临床价值

  • 分类:学术讲座
  • 作者:专业SCI润色实验外包、整体课题外包服务,你值得信赖的合作伙伴--吉妮欧
  • 来源:专业提供(ATCC细胞及其它库源细胞、动物实验外包、CRO服务、SCI润色整体课题外包)
  • 发布时间:2022-03-16 10:09
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【概要描述】应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测慢性乙型肝炎(CHB)肝组织HBVcccDNA 定量,研究肝组织 HBVcccDNA定量与组织及血清 HBV DNA定量、HBsAg滴度、肝实质损害程度及肝组织病理等的关系,以探讨 cccDNA 在 CHB 诊断和治疗中的重要临床价值

研究肝组织慢性乙型肝炎肝内ccDNA关系 探讨ccCDNA在CHB诊断和治疗中的重要临床价值

【概要描述】应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测慢性乙型肝炎(CHB)肝组织HBVcccDNA 定量,研究肝组织 HBVcccDNA定量与组织及血清 HBV DNA定量、HBsAg滴度、肝实质损害程度及肝组织病理等的关系,以探讨 cccDNA 在 CHB 诊断和治疗中的重要临床价值

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  【主题】
  慢性乙型肝炎肝内ccDNA定量测定的临床意义研究
  【目的】
  乙型肝炎病毒(HBV)感染的分子生物学研究表明,在 HBV持续性感染、治疗停止后病情反跳以及耐药方面,共价闭合环状 DNA(cccDNA)起着关键的作用。目前有关cccDNA 的了解多来源于土拨鼠和鸭乙型肝炎病毒动物模型的研究,但从病人中收集的资料很少,国内还未有相关报道。应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测慢性乙型肝炎(CHB)肝组织HBVcccDNA 定量,研究肝组织 HBVcccDNA定量与组织及血清 HBV DNA定量、HBsAg滴度、肝实质损害程度及肝组织病理等的关系,以探讨 cccDNA 在 CHB 诊断和治疗中的重要临床价值。(推荐阅读:HBV模型AAV/HBV诱导的慢性HBV感染啮齿动物模型)
  【方法】
  75例CHB患者均来自我院2004年1月~8月住院病人,男59例,女16例,年龄17~48岁,平均33岁。所有患者诊断符合2000年第十次全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》,并排除甲、丙、丁、戊型肝炎和其他原因所致肝损害。所有病例院外半年内未行抗病毒治疗,根据HBeAg的情况,分为HBeAg阳性慢性乙型肝炎和HBeAg阴性慢性乙型肝炎两组,两组资料在年龄、性别、病程等方面均具有可比性。10例非乙肝患者包括∶丙肝2例,自身免疫性肝炎1例,脂肪肝3例,酒精肝2例,不明原因肝损害2例作为对照。应用Rochelight-cycler荧光PCR检测仪检测肝组织cccDNA、组织和血清HBV DNA的拷贝数。
  全自动生化分析仪检测肝功能(ALT等指标)、Roche全自动电化学发光免疫分析仪检测血清HBsAg滴度、肝组织进行炎症活动度分级(G)及纤维化程度分期(S)等,进行统计学分析。
  【结果】
  1.慢性乙型肝炎患者肝组织均检测到cccDNA,定量为1.56×10°拷贝/mg~3.04×10"拷贝/mg(对数值∶4.45±1.23);肝组织HBVDNA定量3.12×10'拷贝/mg~2.34×10'拷贝/mg(对数值;4.89±1.29);血清HBVDNA定量是3.95×10'拷贝/ml~5.34×10"拷贝/ml(对数值∶5.12±1.43)。
  2.肝组织ccDNA定量与组织、血清HBW DNA定量的相关性;肝组织cccDNA定量与组织HBVDNA定量呈高度相关(对数值∶4.45±1.23与4.89±1.29,r=0.737,R0.001);肝组织cccDNA定量与血清HBV DNA定量亦呈正相关(4.45±1,23与5.12±1.43,r=0.427,R0.005)。
  3.HBeAg 阳性患者肝组织cccDNA定量(对数值∶5.33±1.17)、肝组织 HBVDNA 定量(对数值∶6.12±1.2)、血清HBVDNA定量(对数值∶6.50±1.56)高于HBeAg 阴性患者肝组织cccDNA 定量(对数值∶3.56±1.28)、肝组织HBVDNA 定量(对数值∶4.24±1.34)和血清HBVDNA定量(对数值∶4.34±1.64);两两比较差异均有显著性(R0.05)。
  4、血清HBsAg滴度均值;762±201.35COI。肝组织cccDNA定量与血清HBsAg 滴度的关系∶肝组织cccDNA定量与血清HBshg滴度呈正相关(r=0.718,P<0.005)。
  5.肝组织cccDNA定量与肝实质损害指标血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、血浆凝血酶原时间(PT)均不具相关性(P>0,05)。
  6.肝组织cccDNA定量与肝组织病理的关系;肝组织cccONA定量与肝组织炎症活动度《G)及纤维化程度(S)无明显关系。
  【结论】
  1.肝组织cccDNA 定量水平可直接反映体内 HBV 感染及复制情况,是较血清HBV DNA、HBeAg 更可靠的指标,存在 HBVcccDNA 是判断 HBV 感染的金标准,尤其在血清 HBV DNA 低至检测水平以下时,cccDNA 在 CHB 诊断和抗病毒治疗中具有重要临床价值和意义。
  2.肝组织cccDNA定量与血清 HBV DNA定量呈正相关,在临床上动态检测慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA 负荷,有利于了解其肝组织 cccDNA负荷的变化∶但是由于乙型肝炎患者 HBV DNA和肝组织中cccDNA水平相关性不太强,不能通过血清HBV DNA 负荷来妄加推测肝组织 cccDNA 负荷水平。
  3.HBeAg阳性患者肝组织cccDNA定量、组织和血清HBV DNA定量均比HBeAg阴性患者较高,证实了HBeAg是病毒在体内高度复制的指标之一;抗-HBeAg(+)表明病毒复制减弱,传染性降低,但抗-HBeAg(+)的病例仍可检出HBVDNA、ccDNA,仍有较强传染性和病毒复制力,也具有肝损伤持续存在,呈现慢性化或肝硬化的趋势。
  4.肝组织cccDNA定量与血清HBsAg滴度相关性较强,血清HBsAg滴度可能在一定程度上反映肝组织cccDNA定量的状况。
  5.肝组织cccDNA定量与肝实质损害程度与肝组织病理均不具相关性,cccDNA水平不能作为慢乙肝肝组织病变程度的预测指标,提示非细胞溶解机制清除cccDNA占一定地位。
  【关键词】肝炎,乙型,慢性;荧光定量聚合酶链反应;肝炎病毒,乙型;cccDNA;肝功能;肝组织

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