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国内流行B、C基因型序列成功建立两株AAV-HBV小鼠模型为研究B、C 基因利病毒提供新工具

  • 分类:学术讲座
  • 作者:吉妮欧
  • 来源:专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)
  • 发布时间:2022-04-07 16:07
  • 访问量:

【概要描述】乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是主要全球公共卫生问题之一。我国有约8700万感染者,HBV感染是导致我国肝病高发的主要原因之一

国内流行B、C基因型序列成功建立两株AAV-HBV小鼠模型为研究B、C 基因利病毒提供新工具

【概要描述】乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是主要全球公共卫生问题之一。我国有约8700万感染者,HBV感染是导致我国肝病高发的主要原因之一

  • 分类:学术讲座
  • 作者:吉妮欧
  • 来源:专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)
  • 发布时间:2022-04-07 16:07
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  摘要∶
  乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是主要全球公共卫生问题之一。我国有约8700万感染者,HBV感染是导致我国肝病高发的主要原因之一。虽然已鉴定出NTCP是HBV建立细胞感染主要受体之一,但含有人NTCP基因工程小鼠仍不能支持HBV在体内复制。因此,目前HBV研究领域仍需在小鼠中模拟HBV感染,如水动力高压注射法、重组腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导法、人源化人-鼠嵌合肝等。质粒水动力高压注射HBV质粒方式建立的HBV小鼠模型中,HBV病毒持续周期短,更类似一种急性感染,同时,该操作技术要求高,成模率低。AAV介导法建立的AAV-HBV小鼠模型成模率较高,HBV更易建立慢性长期持续感染,近年来在HBV领域中广泛使用。
  HBV感染引起的肝脏相关疾病的临床表现和治疗预后与HBV基因型密切相关。HBV分为A~J共10个基因型16,中国以B和C基因型为主【7。我国HBV感染诱发的肝炎与继发肝癌高发可能与所感染B、C基因型病毒有关,其中C基因型HBV感染更可能导致严重肝病、肝硬化、肝癌的发生。在此之前国内HBV病毒学相关研究中一直使用D基因型病毒株。但D基因型主要分布在印度、南欧和北非地区,我国很少有D基因型报道。本研究建立了中国流行B、C基因型病毒株,并全面分析了AAV-HBV小鼠血清内的HBV病毒标志物变化特征。
  目的
  建立乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型中国流行株腺相关病毒介导的乙肝病毒AAV-HBV小鼠模型,并研究其病毒学变化特征。
  方法
  以B、C基因型HBV流行株序列为基础,并参照常用D基因型病毒序列,分别构建出携带1.3×基因组的腺相关病毒载体质粒∶pAAV-HBV1.3×(B)、pAAV-HBV1.3×(C)和pAAV-HBV1.3x(D)。通过三质粒共转染方法在 293细胞中包装成三种成熟的腺相关病毒载体rAAV-HBV1.3(B)、rAAV-HBV 1.3(C)与rAAV-HBV1.3(D)。C57BLJ小鼠通过尾静脉注射相同剂量的AAV-HBV病毒载体,在注射后不同时间点.用ELISA方法检测血清中HBsAg和HBeAg表达水平,用荧光定量PCR(O-PCR)方法检测小鼠血清中HBV DNA拷贝数。


  结果
  新构建 B、C基因型两株病毒有更高HBsAg表达水平,B基因型小鼠血清中HBsAg检测值(均值)波动在957.67~2 590.04 IU/mL,C基因型小鼠血清HBsAg波动在725.21~3 195.16 U/mL,D基因型小鼠血清HBsAg波动在153.4~531.8IJ/mL。B基因型小鼠血清中.HBsAg与HBVDNA 比值最高.D基因型最低。新构建B、C基因型
  两株病毒表现出与常用D基因型病毒不同的血清动力学特征。B、C基因型小鼠的HBsAg和HBV DNA可在1周内快速达到较高水平,并维持稳定,在第3~4周表现出波动下降,随后表达水平回升。D基因型小鼠HBsAg在10 d内达到峰值,然后不断降低,HBV DNA在第3~4周也有明显波动。B、C、D三种基因型HBeAg在第1周较低,在两周达到峰值,并保持稳定。
  结论
  基于我国流行B、C基因型序列,成功建立了两株AAV-HBV小鼠模型,为研究B、C 基因利病毒提供了新工具。
  关键词∶乙型肝炎病毒;AAV-HBV;B、C基因型

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