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临床前CRO药效学评价 续断离子液体提取物质量

  • 分类:学术讲座
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  • 来源:专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)
  • 发布时间:2022-07-04 17:22
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【概要描述】续断离子液体提取物的质量优于续断壮骨胶囊,具有促进成骨细胞 MC3T3-E1生长和抑制破骨细胞 RAW264.7活性的双向作用

临床前CRO药效学评价 续断离子液体提取物质量

【概要描述】续断离子液体提取物的质量优于续断壮骨胶囊,具有促进成骨细胞 MC3T3-E1生长和抑制破骨细胞 RAW264.7活性的双向作用

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  摘要
  历代本草将续断列为强筋骨、续折伤良药,其有效成分续断皂苷可诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向成骨细胞分化和矿化,促进骨形成蛋白 2(BMP-2)表达的同时,明显增高其下游关键磷酸化蛋白 SMAD1/5/8,P38,ERK1/2的表达量21,还可明显上调成骨细胞护骨因子(OPG)/核因子-kB(NF-kB)受体激活蛋白配体(RANKL)的表达,通过调节成骨细胞的分泌因子而调节破骨细胞的活化131,广泛用于治疗骨质疏松症。(推荐阅读:临床前CRO服务
  续断提取工艺的不同会影响提取物的质量和药效,本研究中采用高氯酸显色法、液相色谱-质谱(LC-MS)法和体外释放法测定,评价了续断离子液体提取物与上市对照药材间的质量差异;通过 MC3T3-EI细胞生长和碱性磷酸酶(ALP)活力测定,评价了续断离子液体提取物对成骨细胞的作用;通过测定对破骨细胞 RAW264.7生长和抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活力的抑制作用,评价了续断离子液体提取物对破骨细胞的影响。
  目的
  建立续断离子液体提取物质量和药效学评价方法。
  方法
  采用紫外分光光度法测定续断离子液体提取物和续断壮骨胶囊中总皂苷的含量,采用桨法测定川续断皂苷Ⅵ的溶出率,采用液相色谱-质谱法测定各成分的含量。以二甲基亚砜为空白对照,通过成骨细胞 MC3T3-E1及破骨细胞RAW264.7生长影响,MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶((ALP)活性影响、RAW264.7细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活力影响等体外细胞试验,评价1.65~200.00 μg/mL续断离子液体提取物的药效。
  结果
  续断离子液体提取物中总皂苷含量和川续断皂苷Ⅵ溶出率分别为86.01%和77.83%,均高于续断壮骨胶囊的78.74%和25.61%。与空白对照组比较,质量浓度为6.25~100.00μg/mL的续断离子液体提取物可显著促进 MC3T3-E1细胞的生长,质量浓度为12.50~200.00μg/mL的续断离子液体提取物可显著抑制RAW264.7细胞的生长和 StrACP酶活力的表达(P<0.05),且呈浓度依赖关系;质量浓度为6.25~200.00μ/mL 的离子液体提取物虽可提高 MC3T3-E1细胞ALP的活性,但差异不显著(P>0.05)。
  结论
  续断离子液体提取物的质量优于续断壮骨胶囊,具有促进成骨细胞 MC3T3-E1生长和抑制破骨细胞 RAW264.7活性的双向作用。
  关键词
  续断;离子液体提取物;成骨细胞;破骨细胞;体外细胞试验;质量评价;药效学评价

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