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腺嘌呤联合番泻叶可成功建立泄泻肾阳亏虚证动物模型,符合泄泻肾阳亏虚证的临床特点

  • 分类:学术讲座
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  • 来源:专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)
  • 发布时间:2022-08-09 11:06
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【概要描述】既往研究发现,泄泻动物模型的单因素西药造模仅复制疾病模型,无法完全符合中医病因病机理论。而传统单因素中药造模虽能反映疾病本质,但操作困难,造模周期长。基于此,本实验通过采用中西药联合的方法来模拟泄泻肾阳亏虚证病证模型

腺嘌呤联合番泻叶可成功建立泄泻肾阳亏虚证动物模型,符合泄泻肾阳亏虚证的临床特点

【概要描述】既往研究发现,泄泻动物模型的单因素西药造模仅复制疾病模型,无法完全符合中医病因病机理论。而传统单因素中药造模虽能反映疾病本质,但操作困难,造模周期长。基于此,本实验通过采用中西药联合的方法来模拟泄泻肾阳亏虚证病证模型

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  摘要
  泄泻是一种常见病和多发病,常伴随发生于糖尿病、溃疡性结肠炎、肠易激综合征等疾病的发生发展过程中,所带来的疾病负担在全球范围内呈现逐年增长趋势。由于其病因、病机及临床表现不同,所表现出的中医证型存在差异,其中肾阳亏虚证为泄泻常见中医证型之一2。探究泄泻肾阳亏虚证的发生机制对于寻求有效的诊断和治疗措施具有十分重要的现实意义。目前,西医“辨病”与中医“辨证”的病证结合诊疗模式逐渐在临床中应用。
  既往研究发现,泄泻动物模型的单因素西药造模仅复制疾病模型,无法完全符合中医病因病机理论。而传统单因素中药造模虽能反映疾病本质,但操作困难,造模周期长。基于此,本实验通过采用中西药联合的方法来模拟泄泻肾阳亏虚证病证模型。
  以方测证作为中医证候模型研究的重要手段,可通过方剂的功效、性质以及药效反应来反证其对应的疾病证候属性。四神丸是治疗泄泻肾阳亏虚证的经典名方,由《普济本事方》中二神丸与五味子散组成,包括补骨脂、肉豆蔻、吴茱萸、五味子、生姜、大枣六味药,具有温肾散寒、涩肠止泻之功。本实验通过四神丸以方测证对泄泻肾阳亏虚证小鼠的疗效及其药效机制进行验证,旨在为泄泻肾阳亏虚证的基础与临床研究提供实验依据。
  目的
  探索建立泄泻肾阳亏虚证小鼠模型的方法。
  方法
  模型建立
  将20只雄性昆明小鼠随机分为空白组和模型组,每组10只。模型组小鼠给予腺嘌呤混悬液50mg/(kg-d)灌胃,每日1次,连续14日;从第8日起给予番泻叶水煎液10g(kg-d)灌胃,每日1次,连续7日。空白组小鼠给予0.4ml无菌水灌胃,每日1次,连续14日。观察两组小鼠一般行为学,分别于造模第1、5、9、13日时测量小鼠体质量、肛温,计算腹泻指数,造模第14日结束时检测血清中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,计算cAMP/cGMP值。
  模型验证
  将另外30只小鼠随机分为正常组、模型对照组和四神丸组,每组10只。模型对照组和四神丸组按照上述方法造模,造模成功后四神丸组小鼠给予四神丸水煎液5g(kgrd)灌胃,每日2 次,连续7日;正常组与模型对照组给予0.35ml无菌水灌胃,每日2次,连续7日。比较各组小鼠一般行为学改变,干预第1、3、7日时体质量、肛温、腹泻指数,以及干预7日后血清中cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP值。
  结果
  造模结果显示,空白组小鼠精神状态及自主活动情况均正常,粪便柔软成形,干湿适中,肛周洁净。模型组小鼠精神状态欠佳,体凉尾冷,爪甲颜色较浅,毛发稀疏无光泽,粪便稀软。与空白组同时间比较,模型组小鼠造模第9、13日时体质量降低,造模第5、9、13日时小鼠肛温降低(P<0.01)。模型组小鼠腹泻指数随着时间延长而逐渐升高,呈时间依赖性;模型组小鼠血清cAMP含量降低,cGMP含量升高,且cAMPleGMP值降低(P<0.01)。模型验证结果显示,四神丸组小鼠精神状态较模型组有所恢复,活动灵活,皮毛光泽度提高,爪甲颜色恢复,粪便稀溏现象减轻。与模型对照组同时间比较,在治疗第3、7 日时,四神丸组腹泻指数均显著降低(P<0.05)。给药7日后小鼠血清cAMP、cGMP水平及cAMP/cGMP值差异均无统计学意义(P>0.05)。
  结论
  腺嘌呤联合番泻叶可成功建立泄泻肾阳亏虚证动物模型,符合泄泻肾阳亏虚证的临床特点。
  关键词
  泄泻,肾阳亏虚证,小鼠动物造模,动物模型,腺嘌呤,番泻叶,四神丸

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