

【概要描述】已有研究表明Wnt信号通路在早期肺发育和肺部疾病中至关重要21,但Wnt 5a作为Wnt信号通路中的关键因子在BPD中的作用鲜有报道。本研究采用Western blot和胸腺嘧啶脱氧核苷类似物(EdU)染色法检测BPD细胞和动物模型中肺泡表面标志物表面活性蛋白C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)、Wnt 5a蛋白表达水平以及细胞增殖能力的变化,初步探讨Wnt 5a在BPD发生发展中的作用及意义
【概要描述】已有研究表明Wnt信号通路在早期肺发育和肺部疾病中至关重要21,但Wnt 5a作为Wnt信号通路中的关键因子在BPD中的作用鲜有报道。本研究采用Western blot和胸腺嘧啶脱氧核苷类似物(EdU)染色法检测BPD细胞和动物模型中肺泡表面标志物表面活性蛋白C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)、Wnt 5a蛋白表达水平以及细胞增殖能力的变化,初步探讨Wnt 5a在BPD发生发展中的作用及意义
摘要
支气管肺发育不良(broncho-pulmonary dysplasia,BPD)是极早产儿常见的不良结局。随着孕妇糖皮质激素以及早产儿肺泡表面活性物质替代疗法的广泛应用,早产儿存活率显著提高,但BPD发病率逐年上升。
已有研究表明Wnt信号通路在早期肺发育和肺部疾病中至关重要21,但Wnt 5a作为Wnt信号通路中的关键因子在BPD中的作用鲜有报道。本研究采用Western blot和胸腺嘧啶脱氧核苷类似物(EdU)染色法检测BPD细胞和动物模型中肺泡表面标志物表面活性蛋白C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)、Wnt 5a蛋白表达水平以及细胞增殖能力的变化,初步探讨Wnt 5a在BPD发生发展中的作用及意义。
目的
探究Wnt 5a在支气管肺发育不良(BPD)动物模型中的作用机制。
方法
(1)细胞水平∶将A549细胞分为对照组(CO,体积分数5%)和BPD组(O,体积分数85%)。在高氧48h后采用Western blot方法检测肺表面活性物质相关蛋白质C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)和Wnt 5a蛋白水平,细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖能力变化。
(2)动物水平∶将新生大鼠随机分为对照组(O,体积分数21%)和BPD组(O,体积分数85%)。高氧7d后取肺组织,采用HE 染色评估BPD动物模型病理变化;采用Western blot检测肺组织中Wnt 5a、SPC及AQP5变化。
(3)细胞水平∶进一步在BPD细胞模型中添加 Wnt 5a抑制剂,验证Wnt 5a对$PC、AQP5蛋白及细胞增殖能力的影响。结果 与对照组比较,BPD细胞模型中SPC和AQP5表达量降低,Wnt 5a表达量升高,细胞增殖能力降低。添加Wnt 5a抑制剂后SPC、AQP5 蛋白表达升高,A549细胞增殖能力恢复。BPD动物模型中出现明显的肺组织肺泡数量减少、肺泡面积增大等病理表现;SPC、AQP5、Wnt 5a蛋白表达变化同BPD细胞模型趋势一致。
结论
Wnt 5a在BPD的发生发展中被异常激活,深入探索Wnt 5a在BPD中的作用机制可能会为BPD的防治提供新思路。
关键词
大鼠模型,模型大鼠,小鼠模型,模型小鼠,动物模型,动物造模
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