摘要
　　子宫内膜作为具有高度再生能力的组织，是由上皮细胞（包括管腔上皮细胞和腺上皮细胞）和支持间质细胞构成，其在女性育龄期内经历约400多个周期性的再生与脱落。
　　子宫内膜被划分为功能层和基底层，内膜表面约 2/3 厚度为致密层和海绵层统称功能层，受卵巢性激素影响发生周期性增殖和脱落；而基底层为靠近子宫肌层的约 1/3 厚度内膜，不受卵巢性激素影响，无周期性变化PL。
　　宫腔粘连（intrauterine adhesion， IUA）是指子宫内膜间质大部分被纤维组织取代，功能层被单层上皮细胞取代，由于单层柱状上皮细胞对雌激素刺激无反应，子宫内膜无法正常再生，形成纤维性瘢痕组织。已知 IUA 的发生主要由不完全流产后的扩张刮除术、产后出血及选择性流产引起，其他少见诱发因素包括子宫肌瘤切除术、诊断刮除术、剖宫产术、生殖道结核和子宫填塞等。
　　随着宫腔镜和妇科手术的普及，IUA 的发生率不断上升，患者主要表现为月经紊乱，如闭经、痛经和月经过少，上述变化均显著影响胚胎着床，导致患者出现反复流产或不孕等生育功能障碍。
　　并且IUA患者常规宫腔镜手术后所引起的妊娠并发症如∶早产、胎盘植入及产后出血等，严重影响患者的生理和心理健康。
　　因此，建立符合临床损伤特征的IUA动物模型，可为深入研究IUA的发病机制和病理变化，探索临床治疗方法提供重要工具和保障。前期研究大多通过动物开腹后，利用机械、电凝及酒精等对模型动物子宫内膜进行损伤，引发模型动物产生类似临床 IUA 症状。但通过开腹方式构建 IUA 模型，必须经子宫外侧浆膜层及肌层进入，会造成子宫局部全层的损伤，与临床常见原因造成 IUA 的损伤特点存在差异。
　　因此，本构建方法采用小鼠作为模型动物，通过微创的方式保留子宫全层结构，经宫颈机械损伤+脂多糖灌注法构建宫腔粘连模型，为后续机制及治疗方法研究提供稳定的动物模型。
　　目的
　　通过微创的方式，利用机械损伤联合脂多糖灌注法构建符合临床损伤特征的宫腔黏连（intrauterine adhesion，IUA）动物模型，为深入研究 IUA 的发病机制、病理变化以及探索临床治疗方案提供支持。
　　方法
　　取雌性ICR 小鼠 20 只随机分为 2 组（n=10），间苯三酚松弛宫颈后，造模组动物经宫颈给予宫腔内机械损伤+脂多糖（LPS）灌注（0.5 mg/kg），假手术组动物仅接受等体积生理盐水灌注。分别于术后7、14、21 d收集子宫标本，常规 HE 和 Masson 染色，检测子宫内膜形态及纤维化情况；免疫荧光检测子宫内膜中巨噬细胞（F4/80）分布，qPCR 及 Western Blot 检测造模 14 d小鼠子宫内膜中炎症因子（IL-18、TNF-α、Ⅱ-4、L-10和IL-6）及子宫内膜容受性相关标志物（Integrin β3和LIF）的表达变化。随后，取20只小鼠随机分为经宫颈机械损伤+脂多糖灌注组（n=10）为造模组和假手术组（n=10），造模 2 周后合笼，记录妊娠母鼠数量；妊娠约18d处死母鼠，记录胚胎数量。
　　结果

　　机械损伤+脂多糖灌注后小鼠子宫中炎症反应和纤维化程度显著增加。其中模型组小鼠子宫内膜厚度较假手术组显著降低，子宫内膜细胞坏死明显，腺体缺失，腔上皮和腺上皮细胞结构不完整，组织纤维化严重。随后，检测发现巨噬细胞标志物 F4/80在模型组小鼠子宫内膜中表达显著上升（P<0.05），并且模型组小鼠子宫内膜中促炎因子IL-1β、TNF-α、和Ⅱ-6表达显著升高（P<0.05），而抑炎因子IL-4、IL-10表达明显下降（P<0.05）。进一步研究发现子宫内膜容受性标志物LIF和Integrinβ3表达量显著下降（P<0.05），且生育实验结果发现妊娠母鼠及胎鼠数量均显著下降（P<0.05）。
　　结论
　　本研究通过微创的方式经宫颈机械损伤+脂多糖灌注，成功建立小鼠 IUA 模型构建方法，符合临床IUA损伤特征，可为后续针对IUA发病机制及治疗方法研究提供稳定的动物模型。
　　关键词
　　宫腔粘连,机械损伤,脂多糖,动物模型,小鼠模型,模型小鼠,动物造模,模型动物