摘要
　　创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）是目前导致死亡和致残的主要原因之一则。研究表明约50%以上创伤相关死亡与TBI密切相关，美国约40%TBI损伤幸存者发展为长期残疾，可导致显著的海马萎缩，并伴有语言记忆和认知功能受损。其复杂的病理生理过程涉及创伤性机械力，导致内皮或脑实质的原发性或继发性脑损伤口。继发性损伤发生在原发性损伤介导的神经炎症、免疫反应、氧化应激、线粒体功能障碍和细胞凋亡之后，可能持续数小时到数天。此外继发性损伤阻碍现存神经保护和修复机制，能够导致长期认知和功能性神经损伤口。
　　Krupple样因子（Kruppel-like Factor，KLF）是一个由17个成员组成的锌指转录因子家族，调控多种重要的生理和病理过程，包括增殖、分化和细胞死亡国。在所有17个KLF家族成员中，KLF6和KLF7都是视神经轴突再生所必需的调控转录因子，而且，KLF7促进神经突起生长的能力是KLF6的两倍以上。KLF7在成人组织中广泛表达，在脑和脊髓中占优势。在TBI模型中，一些KLF家族成员如KLF4、KLF11和KLF6在神经元损伤、缺氧/复氧损伤、轴突生长和运动神经元存活中起重要作用。前期研究发现KLF7在周围神经损伤或脊髓损伤模型中可提高移植种子细胞的存活率，促进轴突再生但KLF7对TBI的机制研究尚未见报道。
　　本研究对HT22海马神经元细胞进行拉伸（stretch）结合氧葡萄糖剥夺（oxygen-glucose depri-vation，OGD）处理，复制体外TBI细胞损伤模型，探讨KLF7对TBI诱导HT22细胞增殖、凋亡损伤作用及其机制，为临床TBI损伤提供新的治疗靶点。
　　关键词
　　创伤性脑损伤,细胞模型,KLF7,细胞凋亡,海马神经元细胞,HT22
　　目的
　　探讨KLF7对创伤性脑损伤诱导海马神经元细胞（HT22细胞）增殖、凋亡损伤作用及其机制。
　　方法
　　HT22细胞培养和TBI体外模型（stretch联合0GD）制备，应用AAV-KLF7、AAV-NC腺病毒转染HT22，将细胞分为control组（未处理细胞）、SOAN组（strtch+0GD处理后应用 AAV-NC转染）、SOAK 组（stretch+0GD处理后应用 AAV-KLF7转染）、SOAK-AC490）（SOAK 组加入 AG490）和 SOAN-AG490组（SOAN组加入 AG490），应用Westerm blots 和 qRT-PCR 检测各组KLF7及p-JAK2、t-JAK2、p-STAT3、t-STAT3、凋亡因子Bel-2、Bax和C-caspase3表达水平；免疫荧光染色检测各组KLF7及βⅢ-tubulin表达，乳酸脱氢酶（LDH）活性试剂盒测定各组 LDH表达，Caspase-3 活性试剂盒检测各组 Caspase-3 活性；PI免疫荧光染色及CCK-8法检测各组细胞增殖和活性情况；ChP检测转录因子KLF7与STAT3启动子的结合作用和结合位点。
　　结果
　　与 control 组比较，stretch+0GD 损伤后 KLF7表达、PI阳性细胞百分比、LDH和 caspase-3 活性、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著增高；细胞活性、βⅢ-tubulin和Bel-2表达均显著降低（P<0.05）；与SOAN组比较，SOAK组KLF7表达、细胞活性、βⅢ-tubulin和Bel-2表达、p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3 比值均显著增高，PI阳性细胞百分比、LDH和caspase-3活性、Bax和C-caspase-3蛋白表达均显著降低（P<0.05）；90AK-AG490组PI 阳性细胞百分率、LDH和 caspase3 活性增加，p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3相对表达及细胞活力降低（P<0.05）。SOAN、SOAN-AG490、SOAK-AG490三组间PI阳性细胞百分率、LDH和caspase3活性、Bel-2、Bax和C-caspase-3蛋白表达和细胞活力无显著性差异（P>0.05）。ChIP结果表明KLF7与p-STAT3之间有直接相互作用。

　　结论
　　KLF7能够抑制海马神经元TBI损伤细胞模型凋亡，机制可能与上调JAK2/STAT3信号通路表达有关。