摘要
　　类风湿关节炎RA模型,关节炎模型,关节炎动物模型,大鼠模型,模型大鼠
　　类风湿关节炎（RA）是一种病因未明的慢性、进行性、全身性自身免疫性疾病，其基本的病理改变为关节滑膜的异常增生、血管翳形成，并逐渐出现关节的软骨和骨破坏，最终导致关节畸形以及功能丧失。RA 在我国的患病率约为0.35%，并且具有高度的致残率。
　　类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RA-FLS）（推荐阅读：类风湿性关节炎(RA)模型、MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞、HFLS-RA人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞）在白细胞介素-18（IL-18）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子的刺激下表现出抗凋亡的细胞特性，使滑膜炎症和异常增生持续存在I'-O。越来越多的结果指出，除抗细胞凋亡的特性以外，自噬是RA-FLS过度增生的又一重要机制。RA-FLS通过上调自噬相关蛋白，如自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达水平，及时清除错误折叠蛋白、受损的细胞器等变性的胞浆成分，延长自身的存活时间，进一步减少其凋亡167。以上表明RA-FLS低凋亡率和高自噬水平促进了RA滑膜炎的发生并加重RA病情。
　　祖国医学认为RA属于“痹证”范畴，可分为风寒湿痹型、风湿热型、寒湿阻络型、痰瘀互结型及肝肾两虚型6种证型。风湿热痹作为RA临床常见证型，可因久居炎热潮湿之地，外感风湿热邪，袭于肌腠，壅于经络，痹阻气血经脉，滞于关节筋骨或素体阳盛，内蓄积热，复感风湿之邪，入里从阳化热等引起，临床上以游走性关节疼痛，活动不便，关节灼热红肿，强硬不舒，喜冷恶热，得冷则舒，可有皮下结节或红癜，常伴发热、恶风、汗出、口渴、烦躁不安、舌红、苔黄或黄腻、脉滑数或浮数为主要表现P。
　　辨证论治是中医学理论核心，为了在基础研究中体现中医辨证论治，以更好地探讨与诠释疾病的发病机制，采用“病证结合”的原则，在模拟西医病理因素基础上，加以中医对“证”的考量，基于实验理论设计中医证候模型不失为一种较好的研究思路10。病证结合动物模型亦是实现中医药现代化发展的关键II，其既能保证疾病发病的统一性，又能体现“证”的一致性，体现现代医学与传统医学相结合的巨大优势，可为临床研究与治疗提供科学可靠的实验依据，有利于进一步了解疾病的发生发展规律，在促进中医药对疾病防治具有重大意义。
　　因此，本研究基于对RA风湿热痹病因病机的认识，尝试在灭活结核杆菌（Mtb）诱导下建立RA风湿热痹动物模型，从全身炎症指标、自噬与凋亡相关蛋白及基因表达等多层次对模型进行综合评价，为完善 RA 病证结合动物模型提供更多的实验依据，以期用于防治RA的药物相关研究。
　　目的
　　本研究将从炎症、自噬与凋亡相关蛋白的角度评价灭活结核分枝杆菌（Mtb）诱导类风湿关节炎风湿热痹动物模型，深入探究风湿热痹证模型组大鼠（FSR组）与佐剂性关节炎模型组大鼠（AA组）的区别，为完善类风湿关节炎（RA）病证结合动物模型提供更多的实验依据，以期用于防治RA的药物相关研究。
　　方法
　　将30只6周龄SD大鼠随机分为3组，每组10只，分别为正常组、AA组和FSR组。AA组与FSR组注射Mtb诱导剂（1mg/只）建立RA大鼠模型，正常组大鼠尾根部注射等体积生理盐水。FSR组连续干预16d。实验过程中对比各组大鼠一般情况、体质量、脾脏指数、足趾肿胀度、关节炎指数（AI）、足踝关节与滑膜组织病理学改变、白细胞介素-1β（IL-18）与肿瘤坏死因子-a（TNF-a）用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清与mRNA的表达水平、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）与Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA 与蛋白表达水平、自噬相关蛋白1轻链3（LC3）、自噬关键分子酵母Atg6（Beclin1）与p62的mRNA与蛋白的表达水平。
　　结果
　　与正常组比较，AA 组和FSR 组出现毛发枯槁，色泽暗淡，大便稀软甚至湿烂，体质量增长减慢，行动缓慢，脾脏肿大，足踝部关节红肿，关节炎指数升高，足踝关节与滑膜组织均出现不同程度的病理改变，血清与滑膜组织中IL-18、TNF-α以及滑膜组织中IL-16、TNF-α的mRNA表达水平升高，滑膜组织Bax、p62的mRNA和蛋白表达水平降低，LC3、Beclin 1、Bc-2 的mRNA和蛋白表达水平升高。与AA组比，FSR组发病情况更为严重。FSR组大鼠倦怠乏力，懒动喜卧，精神颓靡，体质量增长显著减慢（P<0.01），脾脏指数显著升高，脾脏显著增大（P<0.05），足踝部关节显著红肿，足踝关节炎指数显著升高（P<05）；大鼠滑膜组织和足踝关节大量炎性细胞弥散，关节腔内大量血管翳充斥，关节破坏显著；血清IL-1β、TNF-α含量（P<0.05）以及滑膜组织中IL-18、TNF-α的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）；滑膜组织Bax、p62的mRNA 和蛋白表达水平显著降低（P<0.05），LC3、Beclin1、Bc1-2的mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<05）。

　　结论
　　在Mtt 诱导的基础上联合外界风湿热环境刺激，可以成功诱导具有RA风湿热痹的动物模型，与AA组相比，FSR组大鼠全身炎症程度加重，滑膜细胞凋亡水平显著降低，自噬水平显著增强，提示FSR组在RA风湿热痹研究中更具有针对性。