摘要
　　骨质疏松模型,大鼠模型,模型大鼠,动物模型,
　　女性进入绝经期后，由于体内雌激素水平降低，全身骨形成与骨吸收的动态平衡被打破，使骨的形成小于骨的吸收速度，从而导致骨量快速流失，造成骨折的几率大大增加."，这个问题影响着绝大多数绝经后妇女的身心健康，使她们遭受着骨质疏松折磨。对于其治疗方案，一般采用激素替代治疗Pl，并且联合其他药物治疗时效果更佳!】。治疗的激素有合成雌激素和植物雌激素两类，但合成雌激素一般副作用较大，易引起乳腺癌，子宫内膜癌，静脉栓塞等I4g。而植物雌激素是在天然的植物中提取，有雌激素样作用且药效温和毒副作用小，在临床用药上越来越受欢迎I7】。
　　藏药二十五味鬼臼丸是藏医用于治疗各种妇科疾病的经典药物，最早收载于藏医古典名著《四部医典》，其组成成分含有异黄酮、木脂素等植物雌激素ID。处于围绝经期的妇女，及时的补充植物雌激素会有效的预防和治疗更年期综合征。在临床应用中，藏药二十五味鬼臼丸对于妇女生殖系统疾病，如子宫橐肿、盆腔炎症、阴道炎、宫颈炎等有良好的治疗效果，对临床症状的治愈率达到90%以上9-0，有效减少疾病的复发，无毒副作用。本研究团队在前期的研究中已经证实其具有植物雌激素样作用且可以通过雌激素受体调控骨密度I"，但二十五味鬼臼丸对骨质疏松的保护作用仍不明确。本实验选择与成骨细胞相关的Wnt/β-catenin信号通路，探讨二十五味鬼臼丸在卵巢切除诱导的雌激素缺乏大鼠中的抗骨质疏松作用，并阐明可能的分子机制。
　　目的
　　探讨藏药二十五味鬼臼丸通过经典 Wnt/B-catenin 信号通路改善去卵巢大鼠的骨质疏松症的机制。
　　方法
　　将 48 只3月龄 SD 雌性大鼠随机分为模型组（OVX）、假手术组（Sham）、雌二醇组（Ea）、藏药二十五味鬼臼丸高（GJ-H）、中（GJ-M）、低（GJ-L）剂量组，除假手术组大鼠摘取卵巢附近部分脂肪组织外，其余各组大鼠均摘取卵巢构建去卵巢骨质疏松大鼠动物模型。术后2周开始给药处理，雌二醇组给予戊酸雌二醇 0.1 mg·kg'，藏药二十五味鬼臼丸组给予藏药二十五味鬼臼丸高剂量 800 mg；kg'，中剂量400mg；kg'，低剂量200mg；kg'，模型组及假手术组给予同体积的生理盐水，连续灌胃12周，每日一次。取材后，HE 染色法观察大鼠右侧股骨及腰椎的骨形态变化酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP5b）、I型胶原C端肽（CTX-I）、骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、I型前胶原氨基端原肽（PINP）、骨钙素（BGP）的水平，RT-PCR 检测股骨中β-连环蛋白（β-catenin）、矮小相关转录因子2（Runx2）mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 B-catenin、Runx2和低密度脂蛋白受体相关蛋白5（Lrp-5）蛋白表达。
　　结果
　　与假手术组比较，模型组大鼠骨小梁紊乱且稀疏，骨小梁间连接较少，血清 BALP、BGP、PINP水平显著下降（P<01），CTX-I、TRAP5b水平显著升高（P<01）；股骨组织中β-catenin、Runx2mRNA的表达水平下降（P<0.01） ；Lrp-5、B-catenin和Runx2的蛋白表达下降（P<0.01）。与模型组比较，藏药二十五味鬼臼丸高、中、低剂量组大鼠上述指标的异常改变得到不同程度的恢复（P<0.05，P<0.01）。

　　结论
　　藏药二十五味鬼臼丸对于治疗去卵巢大鼠骨质疏松症具有较好的效果，其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关，通过上调信号通路中成骨相关基因的表达影响骨代谢。