摘要
　　关键字：卵巢摘除骨质疏松大鼠模型,大鼠模型,模型大鼠,骨质疏松模型,动物模型
　　骨质疏松是一种进展性的以破骨细胞介导的骨吸收与成骨细胞介导的骨生成之间失衡为特征的全身骨代谢障碍性疾病，近年来，抑制骨吸收、刺激骨生成的两大策略构成了抗骨质疏松、恢复骨吸收与骨生成动态平衡的理论基础。临床上抑制骨吸收类药物主要有雌激素、双磷酸盐类等，长期使用雌激素会引起多种并发症而受限~；双磷酸盐类会增加食道溃疡的发生，使用也受限B。甲状旁腺素类似物是促进骨形成的药物，持续应用会引起骨吸收增加的风险。因此，迫切需要从天然资源中获得高效低毒的新型候选药物来治疗骨质疏松症。
　　中医药治疗骨质疏松的方剂药物种类繁多，针对中医对骨质疏松证候肾虚血瘀的描述，我们采用熟地黄、牛膝、龟板胶、鹿角胶、山药、山茱萸、枸杞子、菟丝子、淫羊藿和女贞子等10味药配伍补肾方中药汤剂5。
　　我们前期采用补肾方大鼠灌胃血清干预大鼠成骨细胞，可观察到与骨形成信号通路相关调控信号高表达"；干预大鼠骨髓间充质干细胞，可降低其成脂分化进一步采用Micro-CT技术对补肾方干预的骨质疏松动物模型的骨骼标本进行体视学观察。
　　Micro-CT是一种成熟的研究小动物骨骼和血管形态学的可视化方法。Micro-CT将X射线和计算机技术相结合，基于肌体不同组织成分对X射线的不同吸收，产生机体的水平或轴向图像，具有空间分辨率高、图像采集时间短和整体成像能力强的优点。骨基质中存在羟基磷灰石，是一种不透光的结缔组织，在骨组织形态计量学中，动物骨骼可以在没有脱钙的情况下，Micro-CT可直接对矿化骨组织进行非破坏性的三维微结构研究。血管属于软组织，对比度相对较低，必须使用造影剂来增强对比度，区分血管与周围软组织。Microfil是一种含有铬酸铅和硫酸铅颗粒的可在血管系统中聚合的低粘度造影剂，可以充填血管网动脉侧和静脉侧的毛细血管"。骨组织周围血管化的形态学分析不仅对描述血管和骨组织之间的解剖和生理关系很重要，而且对理解影响骨微结构的许多病理条件发生的结构改变也很重要。既往有关中药方治疗骨质疏松的研究，多单独使用Micro-CT研究骨微结构，或单独使用Micro-CT分析骨内血管以探究其效能*20。对于药物设计中提及的健骨化瘀未给出直接的可视化数据，且暂无将骨组织周围血管化的形态学分析纳入分析评价的研究。
　　本研究尝试将骨微结构与骨周围血管造影相结合，用影像学技术评价补肾方的药效，探究补肾方活血化瘀通络壮骨的缘由，为补肾方用于临床治疗骨质疏松症提供实验依据。
　　目的
　　基于Micro-CT探究补肾方对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构、骨周围血管体积、骨力学和血清碱性磷酸酶（ALP）的影响。
　　方法
　　选择3月龄雌性SD大鼠30只，随机分为对照组、补肾方干预组和戊酸雌二醇干预组，10只/组，摘除双侧卵巢。造模3月后，分别用注射用0.9%NaCl溶液、补肾方、戊酸雌二醇灌胃干预4周，通过Micro-CT扫描观察股骨微结构和骨周围血管体积，小动物骨骼强度测定仪测量骨折应力和压碎力，并检测大鼠血清ALP活性。
　　结果
　　与对照组相比，Micro-CT扫描结果显示，补肾方干预组可明显改善骨密度（P=0.0114），提高骨体积分数（P=0.0006），增加骨小梁数目（P=0.0016），加厚骨小梁厚度（P=0.0050），血管体积（P<0.0001）；骨骼强度检测显示，补肾方干预组股骨骨折应力增强（P=0.0044）；同时ALP活性增加（P=0.0181）。

　　结论
　　补肾方能显著改善股骨骨微结构，提升骨周围血管体积，增强骨折应力，提高ALP水平，提示其可能成为今后临床治疗骨质疏松患者的配方。