摘要
　　药代动力学,药效实验,临床前CRO药效评价,药效评估,体内药效代谢,药物代谢动力学,动物实验
　　孕壹方为笔者所在单位主治不孕不育、着床困难、经血不调的临床验方，该方由黄芪、党参、大枣、绵茵陈等药味组成，起补气活血、养阴调经、暖宫促孕的作用。
　　研究表明，上述作用与方中君药黄芪的功效活性密切相关。黄芪中所含的黄芪甲苷、毛睿异黄酮葡萄糖苷、黄芪皂苷等成分，均能够起到增强体质、促进新陈代谢和血液循环、抗氧化和激活细胞增殖的药理作用I-6J。因此，在含黄芪类中药方剂和中成药的功效机制、制备工艺、药效物质等研究中，常以黄芪中的活性成分尤其是黄芪甲苷为指标。
　　为更好地了解孕壹方中黄芪甲苷被生物（大鼠）口服后的吸收、分布、代谢、排泄情况，笔者拟对其开展口服药物代谢动力学研究，并根据研究结果，进一步验证该成分能否被生物体充分吸收、利用，为孕壹方的药效评价和功效机制研究提供科学依据。
　　目的
　　测定大鼠口服孕壹方后24h内各时间点的黄芪甲苷血药浓度并计算药物代谢动力学参数，评价该药在生物体内的代谢过程。
　　方法
　　SD大鼠口服治疗量孕壹方汤剂后，在24h内按时间点取血，所得血浆样品使用LC-MS法测定，使用Waters ACQUITY UPLC BEH300 C18色谱柱（2.1×100mm，1.7um），色谱柱温度为40℃，流速为0.3mL/min，流动相为A（含0.1%甲酸的乙腈溶液）和B（0.1%甲酸水溶液），ESI离子源，正负离子同时检测的MRM模式，梯度洗脱条件为，0~0.5min，95%→66%B；0.5~1.0min，66%→30%B；1.0~2.0min，30%→0%B；2~2.5min，0—95% B；2.5~3.0min，95%—95%B，进样2.0uL，检测离子对为黄芪甲苷785.6/143.1（CE：20V），维拉帕米455.0/165.0（CE：25V）。
　　结果
　　根据6只动物平均结果计算，大鼠口服孕壳方汤剂后，T__=4.00h，C__=223.2636ng/mL，T__=2.577h，MRT=4.294h，AUCo=795.331mg/L·h，AUCa=834.236mg/Lh。

　　结论
　　本研究所用方法灵敏度高、准确度好，能够较好地用于评价孕壹方中黄芪甲苷的药代动力学特征。
　　讨论
　　由药代动力学数据可知，黄芪甲苷达峰时间和平均驻留时间较长（4h和4.429h），表明服药后该成分在大鼠体内代谢速度较慢，即发挥最大效用所需时间较长。同时，由图2及药动学中Cma、AUC等参数可知，黄芪甲苷血药浓度在大鼠体内上升较为平缓，但同时吸收较为充分，可以达到较为适宜的血药浓度，上述结果与文献报道及相关药理、药性研究基本相符17-91，从药动学层面证明了黄芪性微温这一中医药理论。同时，图2的血药浓度曲线也表明，孕壹方中黄芪的作用较为温和，对机体伤害小，适宜于孕妇或备孕妇女使用。
　　通常情况下，黄芪甲苷的测定受到提取方法复杂、检测手段较为特别（如高效液相色谱需使用蒸发光散射检测器）等原因，较难实现与黄芪中其他成分同时测定。
　　本文使用LC-MS法，预实验结果显示，黄芪甲苷信号强度较好，图谱中无明显干扰，表明黄芪甲苷能够实现较为充分的离子化，可在质谱中与其他成分实现同时测定，为后续孕壹方及其他含黄芪药物的多指标同时测定提供了科学依据91。
　　色谱条件选择方面，原先使用不含0.1%甲酸的乙腈为流动相；所用样品溶剂中，甲醇也不含甲酸。但预实验中发现，黄芪甲苷信号强度较弱，在浓度较低时难以与干扰实现基线分离。
　　因此，在有机相中加入甲酸，同时适当调整液相梯度，确保黄芪甲苷峰在洗脱前于柱内充分富集；在进入质谱时则受流动相和酸度、离子强度影响充分离子化，确保最大限度提高信号响应，增强了检测灵敏度。