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滨蒿提取物抗乙肝病毒作用和急性毒性研究

  • 分类:学术讲座
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  • 来源:典藏逾1000+株细胞,供ATCC原装代购服务,临床前CRO服务,众多科研技术服务,定制各类疾病动物模型
  • 发布时间:2023-02-07 10:10
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【概要描述】BH 对2.2.15细胞培养上清中HBV DNA表达有明显的抑制作用,IC. 平均为142.5 μg/mL;其对2.2.15细胞上清中HBAg和HBeAg的分泌也有明显的的抑制作用,IC~平均为205.8μg/mL和105.3μg/mL;BH可明显抑制HepG2.2.15细胞内HBY DNA的复制,其IC为95.3μg/mL,还可明显抑制HepAD38细胞HBVDNA的高表达,其IC为97.1μg/mL。BH在小鼠一日内口服给药的MTD为12 g/kgd(相当于原药材480kgd),在14d观察期内未出现明显的急性毒性反应

滨蒿提取物抗乙肝病毒作用和急性毒性研究

【概要描述】BH 对2.2.15细胞培养上清中HBV DNA表达有明显的抑制作用,IC. 平均为142.5 μg/mL;其对2.2.15细胞上清中HBAg和HBeAg的分泌也有明显的的抑制作用,IC~平均为205.8μg/mL和105.3μg/mL;BH可明显抑制HepG2.2.15细胞内HBY DNA的复制,其IC为95.3μg/mL,还可明显抑制HepAD38细胞HBVDNA的高表达,其IC为97.1μg/mL。BH在小鼠一日内口服给药的MTD为12 g/kgd(相当于原药材480kgd),在14d观察期内未出现明显的急性毒性反应

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  摘要
  HBV小鼠模型,毒性研究,毒性实验,乙型肝炎小鼠模型,乙肝小鼠动物模型
  乙肝病毒(HBV)属噬肝DNA病毒科,具有双链环状DNA结构和明显的噬肝性,乙肝病毒侵入机体后,在肝细胞内复制繁殖,引起细胞免疫及体液免疫应答,并激发自身免疫反应及免疫调节功能紊乱,使病变的肝细胞产生或释放大量正常或异常的蛋白质,进一步导致免疫损害加重,使病情不断发展。HBV感染呈世界性流行,同时,它又是最容易变异的病毒之一、可通过基因突变来抵抗药物的效力。目前临床上常用的抗HBV药物均无法彻底清除HBV慢性感染,如干扰素、拉米夫定、齐多夫定等,这些抗病毒药还存在副作用多、停药复发率高、易产生耐药等种种问题.到目前为止,还没有发现一种能够真正清除乙肝病毒,彻底治愈乙型肝炎的药物,因此,HBV感染也被认为是最难治愈的病毒性疾病之一。
  在我国,中药是临床治疗乙型肝炎的重要手段之一,一些中药材有效部位,不仅可抑制乙肝病毒的复制,还可通过调节免疫功能帮助机体清除病毒,因其可能多成分、多靶点发挥抗病毒效应,在抗病毒研究领域受到广泛关注。常用药材中,茵陈、蒲公英、黄芩、黄芪、野菊花、秦艽、杜仲、叶下珠、荔枝核、石榴皮等几十种中药材的提取物经实验研究证实具有抗HBV作用5-U1,能有效抑制乙肝病毒的复制,它们多为抗乙肝中成药或经验方的基本组方药材。
  研究这些中药材及其提取物的抗乙肝病毒作用,不仅可为传统中医药治疗乙型肝炎的临床应用提供实验依据,还有助于从传统药物中探寻新的抗病毒天然产物。滨蒿(Artemisia scoparia Waldst.et kit)学名猪毛蒿,古代本草中称北茵陈或山茵陈,民间又称“土茵陈”,为菊科蒿属多年生草本植物,其收载于《中国药典》,与茵陈蒿同为中药材茵陈的植物来源,药用部位为干燥地上部分。滨蒿其植株具有浓烈的香气,性味苦、辛、微寒,具有清湿热、退黄疸等功效,其滨蒿作为传统中药材常用于治疗传染性黄疸型肝炎,但有关其抗乙肝病毒作用的实验研究尚未见报道。滨蒿原植物在欧、亚大陆温带与亚热带地区广泛分布,生长于草原坡地、荒漠边缘、林边路旁等。
  在我国西北地区,滨蒿的资源分布比茵陈蒿更为广泛,其适应性、再生性和抗逆性强。新疆地区的滨蒿野生资源极为丰富,其作为维吾尔医常用药材也有悠久的应用历史,维吾尔医认为其具有清热解毒、开窍化痰、消败津、除积物等功效。滨蒿虽作为常用药材在我国中医学中有悠久的应用历史,但其相关基础研究还比较薄弱,远不如茵陈蒿。据报道LED. 滨蒿中含有香豆素、酚酸、黄酮类、挥发油、色原酮等多种成分,其化学成分与茵陈蒿相近,但有所不同。
  笔者前期研究表明,滨蒿提取物中含有蓟黄素、槲皮素、金丝桃苷等黄酮类成分,以及3,5—二咖酰奎宁酸等多种酚酸类成分E22,其具有明确的抗流感病毒作用,并可调节机体的免疫功能.鉴于滨蒿作为西陈药材源在传统中医药中常用于乙型肝炎的治疗,而其在抗乙肝病毒方面的基础研究以往未见报道,本研究通过体外实验考察滨蒿提取物在两种载体细胞中对HBV复制的干预作用,为滨蒿的传统应用提供科学依据,并为滨蒿提取物作为广谱抗病毒天然产物继续深入研究奠定基础。
  目的
  通过考察滨嵩提取物(BH)在载体细胞中对人乙肝病毒(HBV)DNA复制的干预作用,并观察其在小鼠口服给药的急性毒性反应,为滨蓄作为传统中药材治疗乙型肝炎的临床应用提供实验依据。方法,采用ABN转染人肝癌细胞的Hep(2.2.15细胞模型,荧光定量PCR检测BH对细胞培养上清中HBVDNA表达的影响;酶联免疫法(ELISA)检测 BH对细胞培养上清中乙肝病毒表面抗原(HBAg)和e抗原(HBeAg)分泌的影响。以荧光定量PCR法检测乙肝病毒载体细胞HepC2.2.15细胞和HepAD38细胞内HBVDNA的表达量,观察 BH对两种载体细胞中 HBY复制的抑制作用。测定 DH在小鼠灌胃给药的一日内最大给药量(MTD),观察给药后14d内出现的急性毒性反应。
  结果
  BH 对2.2.15细胞培养上清中HBV DNA表达有明显的抑制作用,IC. 平均为142.5 μg/mL;其对2.2.15细胞上清中HBAg和HBeAg的分泌也有明显的的抑制作用,IC~平均为205.8μg/mL和105.3μg/mL;BH可明显抑制HepG2.2.15细胞内HBY DNA的复制,其IC为95.3μg/mL,还可明显抑制HepAD38细胞HBVDNA的高表达,其IC为97.1μg/mL。BH在小鼠一日内口服给药的MTD为12 g/kgd(相当于原药材480kgd),在14d观察期内未出现明显的急性毒性反应。

HBV小鼠模型,毒性研究,毒性实验,乙型肝炎小鼠模型,乙肝小鼠动物模型

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  结论
  滨嵩提取物在无毒浓度下对HepG2.2.15细胞内HBVDNA的稳定表达以及HepAD38细胞内HBVDNA的高表达均有良好的抗乙肝病毒作用,并且在小鼠口服给药安全性好。滨蒿提取物在抗乙肝病毒方面有较高的研究和应用价值。

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