摘要
　　HBV小鼠模型,毒性研究,毒性实验,乙型肝炎小鼠模型,乙肝小鼠动物模型
　　乙肝病毒（HBV）属噬肝DNA病毒科，具有双链环状DNA结构和明显的噬肝性，乙肝病毒侵入机体后，在肝细胞内复制繁殖，引起细胞免疫及体液免疫应答，并激发自身免疫反应及免疫调节功能紊乱，使病变的肝细胞产生或释放大量正常或异常的蛋白质，进一步导致免疫损害加重，使病情不断发展。HBV感染呈世界性流行，同时，它又是最容易变异的病毒之一、可通过基因突变来抵抗药物的效力。目前临床上常用的抗HBV药物均无法彻底清除HBV慢性感染，如干扰素、拉米夫定、齐多夫定等，这些抗病毒药还存在副作用多、停药复发率高、易产生耐药等种种问题.到目前为止，还没有发现一种能够真正清除乙肝病毒，彻底治愈乙型肝炎的药物，因此，HBV感染也被认为是最难治愈的病毒性疾病之一。
　　在我国，中药是临床治疗乙型肝炎的重要手段之一，一些中药材有效部位，不仅可抑制乙肝病毒的复制，还可通过调节免疫功能帮助机体清除病毒，因其可能多成分、多靶点发挥抗病毒效应，在抗病毒研究领域受到广泛关注。常用药材中，茵陈、蒲公英、黄芩、黄芪、野菊花、秦艽、杜仲、叶下珠、荔枝核、石榴皮等几十种中药材的提取物经实验研究证实具有抗HBV作用5-U1，能有效抑制乙肝病毒的复制，它们多为抗乙肝中成药或经验方的基本组方药材。
　　研究这些中药材及其提取物的抗乙肝病毒作用，不仅可为传统中医药治疗乙型肝炎的临床应用提供实验依据，还有助于从传统药物中探寻新的抗病毒天然产物。滨蒿（Artemisia scoparia Waldst.et kit）学名猪毛蒿，古代本草中称北茵陈或山茵陈，民间又称“土茵陈”，为菊科蒿属多年生草本植物，其收载于《中国药典》，与茵陈蒿同为中药材茵陈的植物来源，药用部位为干燥地上部分。滨蒿其植株具有浓烈的香气，性味苦、辛、微寒，具有清湿热、退黄疸等功效，其滨蒿作为传统中药材常用于治疗传染性黄疸型肝炎，但有关其抗乙肝病毒作用的实验研究尚未见报道。滨蒿原植物在欧、亚大陆温带与亚热带地区广泛分布，生长于草原坡地、荒漠边缘、林边路旁等。
　　在我国西北地区，滨蒿的资源分布比茵陈蒿更为广泛，其适应性、再生性和抗逆性强。新疆地区的滨蒿野生资源极为丰富，其作为维吾尔医常用药材也有悠久的应用历史，维吾尔医认为其具有清热解毒、开窍化痰、消败津、除积物等功效。滨蒿虽作为常用药材在我国中医学中有悠久的应用历史，但其相关基础研究还比较薄弱，远不如茵陈蒿。据报道LED. 滨蒿中含有香豆素、酚酸、黄酮类、挥发油、色原酮等多种成分，其化学成分与茵陈蒿相近，但有所不同。
　　笔者前期研究表明，滨蒿提取物中含有蓟黄素、槲皮素、金丝桃苷等黄酮类成分，以及3，5—二咖酰奎宁酸等多种酚酸类成分E22，其具有明确的抗流感病毒作用，并可调节机体的免疫功能.鉴于滨蒿作为西陈药材源在传统中医药中常用于乙型肝炎的治疗，而其在抗乙肝病毒方面的基础研究以往未见报道，本研究通过体外实验考察滨蒿提取物在两种载体细胞中对HBV复制的干预作用，为滨蒿的传统应用提供科学依据，并为滨蒿提取物作为广谱抗病毒天然产物继续深入研究奠定基础。
　　目的
　　通过考察滨嵩提取物（BH）在载体细胞中对人乙肝病毒（HBV）DNA复制的干预作用，并观察其在小鼠口服给药的急性毒性反应，为滨蓄作为传统中药材治疗乙型肝炎的临床应用提供实验依据。方法，采用ABN转染人肝癌细胞的Hep（2.2.15细胞模型，荧光定量PCR检测BH对细胞培养上清中HBVDNA表达的影响；酶联免疫法（ELISA）检测 BH对细胞培养上清中乙肝病毒表面抗原（HBAg）和e抗原（HBeAg）分泌的影响。以荧光定量PCR法检测乙肝病毒载体细胞HepC2.2.15细胞和HepAD38细胞内HBVDNA的表达量，观察 BH对两种载体细胞中 HBY复制的抑制作用。测定 DH在小鼠灌胃给药的一日内最大给药量（MTD），观察给药后14d内出现的急性毒性反应。
　　结果
　　BH 对2.2.15细胞培养上清中HBV DNA表达有明显的抑制作用，IC. 平均为142.5 μg/mL；其对2.2.15细胞上清中HBAg和HBeAg的分泌也有明显的的抑制作用，IC~平均为205.8μg/mL和105.3μg/mL；BH可明显抑制HepG2.2.15细胞内HBY DNA的复制，其IC为95.3μg/mL，还可明显抑制HepAD38细胞HBVDNA的高表达，其IC为97.1μg/mL。BH在小鼠一日内口服给药的MTD为12 g/kgd（相当于原药材480kgd），在14d观察期内未出现明显的急性毒性反应。

　　结论
　　滨嵩提取物在无毒浓度下对HepG2.2.15细胞内HBVDNA的稳定表达以及HepAD38细胞内HBVDNA的高表达均有良好的抗乙肝病毒作用，并且在小鼠口服给药安全性好。滨蒿提取物在抗乙肝病毒方面有较高的研究和应用价值。