摘要
　　构建膝骨关节炎模型,动物模型,膝骨关节炎模型制备,动物造模,药物诱导动物模型,关节炎兔模型,动物实验
　　膝骨关节炎是一种慢性、退行性关节病，病理表现为关节软骨、软骨下骨的损伤以及滑膜炎症。膝骨关节炎的病因十分复杂，主要病因包括慢性劳损、急性创伤、骨质疏松以及遗传因素等，主要表现为膝关节疼痛以及功能障碍。膝骨关节炎已成为中老年人口劳动力流失的主要原因之一，最终致残率高达53%，是仅次于心脑血管疾病的全球公共卫生问题5-5。
　　当今人口老龄化越发严重，膝骨关节炎的发病率也逐年增加。临床上膝骨关节炎患者病情往往以中晚期为主，对于早期膝骨关节炎病情的研究往往需要依赖于动物实验制备理想的动物模型对于研究该疾病尤为重要。目前膝骨关节炎模型的制备方法主要有关节腔注射蛋白酶诱导法和手术创伤法8-10。关节腔注射蛋白酶诱导法构建的骨关节炎模型并不稳定，往往在成模两三周后出现炎症指标下降，关节功能逐渐恢复，不能充分体现关节软骨的退行性改变，与临床相差较大，不利于该病的深入研究和后期疗效的评估。手术创伤能够使关节产生不可逆损害，成模效果更稳定，因此大多情况下膝骨关节炎的造模方式以手术诱导为主。手术诱导法包括传统Hulth法及改良Hulth法。传统Hulth法切断膝关节的前交叉韧带、后交叉韧带、内侧副韧带以及摘除内侧半月板，该方法操作要求高且对关节损伤大已被逐渐淘汰。改良Hulth法虽保留了后交叉韧带，同样对关节损害较大，严重影响实验动物的日常活动12。传统Hulth法与改良Hulth法虽能构建膝骨关节炎模型，但对膝关节损害过大，成模过程不符合临床上膝骨关节炎的发病机制。因此探索新的更符合临床特征的膝骨关节炎模型成为研究重点。
　　此次研究采用了新西兰大白兔作为实验动物，相比于大鼠、小鼠、狗等常用动物，优点主要有：
　　①性格温顺，容易饲养，便于实验研究；
　　②兔关节较大，便于观察关节内部变化，且与人体膝关节结构相符；
　　③价格低廉，易于获取。
　　通过文献研究与初步探索，此次研究采用3种不同手术方式进行造模，综合比较每组模型的一般情况、影像学、组织学及相关炎症因子改变，全面评价造模是否成功，提出不同分期的膝骨关节炎模型构建方案，以期为研究膝骨关节炎提供更符合临床的建模方案。
　　背景
　　目前常用的膝骨关节炎动物模型制备方法主要有手术创伤和关节腔内注射蛋白酶诱导两大类。关节腔内注射药物诱导模型并不稳定，传统的手术造模方法对膝关节损伤较大，且成模过程与临床膝骨关节炎的发展过程差异较大。
　　目的
　　通过不同手术方式损伤膝关节制备兔膝骨关节炎模型，探讨膝骨关节炎动物模型的最佳制备方法。
　　方法
　　将16只雄性五六月龄新西兰大白兔随机分为假手术组、模型A组、模型B组、模型C组，每组4只。假手术组切开右侧膝关节内侧后立即缝合：模型A组磨损右侧膝关节半月板、磨损前交叉韧带；模型B组捕除右侧膝关节半月板、磨损前交叉韧带；模型C组捕除右侧膝关节半月板、切断前交叉韧带。术后连续3d注射抗生素，记录一般情况。4周后通讨X射线片观察关节情况，苏木精-伊红染色观察软骨细织变化，酶联免疫吸附法检测右侧膝滑膜液和血清中炎症因子水平。
　　结果
　　①模型组右侧膝关节明显出现红肿热痛情况，皮温明显高于假手术组；
　　②术后模型组右侧膝关节皮温较假手术组明显升高，差异有显著性意义（P<0.05）
　　③X射线片显示劈手术细膝关节朱见异常，棋型细出现不同程度的关节面破坏及关节间陶体窄，其中植烈c细最为严重
　　④苏木精-伊红染色显示假手术组为软骨组织正常形态；模型组出现软骨细胞数量减少，层次紊乱，其中模型C组软骨结构损坏严重，可见血管生成；
　　⑤酶联免疫吸附实验显示，模型组兔血清炎症因子水平较假手术组明显升高，差异有显著性意义（P<0.001）；模型组兔右侧膝关节滑膜液炎症因子水平较假手术组明显升高，差异有显著性意义IP<0.001）；
　　⑥提示通过对各组兔膝关节一般情况、影像学及相关因子改变分析发现，以上3种手术损伤膝关节方法均能成功构建兔膝骨关节炎模型，模型C组已达到膝骨关节炎中晚期改变，模型A、B组符合早中期膝骨关节炎改变；
　　此外实验证实膝骨关节炎病情进展速度与膝关节损伤程度呈正相关，血清中炎性因子水平相比于滑膜液对膝骨关节炎病情变化更敏感。