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探讨高尿酸血症动脉粥样硬化小鼠动物模型疾病进展的影响及其分子机制

  • 分类:学术讲座
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  • 来源:典藏逾1000+株细胞,供ATCC原装代购服务,临床前CRO服务,众多科研技术服务,定制各类疾病动物模型
  • 发布时间:2023-03-02 09:57
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【概要描述】通过测定小鼠血浆代谢物指标以及分析小鼠动脉粥样硬化斑块面积,评估IDO基因敲除对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展的影响。体外实验分离野生型或IDO*小鼠原代巨噬细胞,给予LPS处理,通过Western blot测定巨噬细胞自噬和NLRP3炎症小体的水平,探索IDO基因敲除对炎性巨噬细胞的影响,以期探讨IDO基因对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展影响的分子机制

探讨高尿酸血症动脉粥样硬化小鼠动物模型疾病进展的影响及其分子机制

【概要描述】通过测定小鼠血浆代谢物指标以及分析小鼠动脉粥样硬化斑块面积,评估IDO基因敲除对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展的影响。体外实验分离野生型或IDO*小鼠原代巨噬细胞,给予LPS处理,通过Western blot测定巨噬细胞自噬和NLRP3炎症小体的水平,探索IDO基因敲除对炎性巨噬细胞的影响,以期探讨IDO基因对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展影响的分子机制

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  摘要
  动脉粥样硬化动物模型,动物造模,小鼠模型,模型小鼠,心力衰竭动物模型,心肌梗塞模型,动物模型,动物实验
  心血管疾病(Cardiovascular diseases,CVDs)相关死亡事件,主要由心力衰竭和心肌梗塞引起,是全球死亡的主要原因,也是一个严重的公共卫生问题。而引起上述两种疾病的主要原因是患者存在动脉粥样硬化。
  此外,动脉粥样硬化还参与脑缺血或动脉瘤的发展。据世界卫生组织(WHO)报告,每年全球死亡人数中的31%与CVDs 相关,而这其中的85%归因于动脉粥样硬化相关心脏病发作和中风D-41。高尿酸血症(Hyperurice-mia)定义为男性血清尿酸浓度>7mg/dL(>420 μmol/L),女性>6mg/dL(>360μmol/L)。(推荐阅读:大脑中动脉栓塞(MCAO)致脑缺血动物模型啮齿动物心肌缺血引起的心力衰竭模型啮齿动物心肌梗塞模型
  流行病学研究表明,我国高尿酸血症患病率为13.3%,其中男性和女性患病率分别约为19.4%和7.9%。2017年受影响的总人口高达1.8亿。2018年欧洲高血压治疗指南强调,高尿酸血症与动脉粥样硬化性CVDs的发展独立相关D。但是具体的致病机制尚未深入研究。
  最新的研究证据显示,氨基酸代谢的改变与动脉粥样硬化的发展之间存在密切的关系。而且大量证据已表明,色氨酸(Tryptophan,Trp)降解的主要途径——犬尿氨酸途径(Kynurenine pathway,KP)具有免疫调节作用。吲哚胺2,3-双加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是Trp代谢的限速酶。那么IDO是否参与动脉粥样硬化的发展,是一个值得深入研究的问题。本项目拟通过在体实验使用遗传背景为C57BL/6J的ApoE*小鼠或ApoE*IDO*小鼠,并给予HFCD联合腹腔注射PO诱导构建高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型。
  通过测定小鼠血浆代谢物指标以及分析小鼠动脉粥样硬化斑块面积,评估IDO基因敲除对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展的影响。体外实验分离野生型或IDO*小鼠原代巨噬细胞,给予LPS处理,通过Western blot测定巨噬细胞自噬和NLRP3炎症小体的水平,探索IDO基因敲除对炎性巨噬细胞的影响,以期探讨IDO基因对高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展影响的分子机制。
  目的
  探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因缺失对PO诱导的高尿酸血症动脉粥样硬化小鼠模型疾病进展的影响及其分子机制。
  方法
  在体实验使用遗传背景为C57BL/6J的ApoE*小鼠(ApoE*组)或ApoE*IDO十(ApoE IDO组)小鼠,给予其高脂富含胆固醇饮食联合腹腔注射 PO诱导构建高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠模型,对照组为野生型(WT组)小鼠给予正常啮齿类饲料;ELISA法测定小鼠血浆总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清尿酸、犬尿氨酸(Kyn)、色氨酸(Trp)并Kyn/Trp比率;油红O 染色分析小鼠动脉粥样硬化斑块面积。体外实验分离野生型或IDO~小鼠原代巨噬细胞,给予LPS处理,通过Westem blot法测定巨噬细胞自噬相关蛋白Parkin、p62、LC3-II/I和NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、Caspase-1和Pro-IL-1B的表达水平。
  结果
  与ApoE★组相比,ApoE*IDO+组小鼠血浆总胆固醇、甘油三酯和LDL-C明显升高;血清尿酸、HDL-C和Kyn/Tip(%)明显降低(P<0.05);油红0染色显示,与ApoE*组小鼠相比,ApoE~IDO+组小鼠的血管动脉粥样硬化斑块面积明显增加(P<0.05)。体外研究显示,与WT+LPS组原代巨噬细胞相比,IDO*+LPS 组细胞自噬相关蛋白Parkin和LC3-II/LC3-I以及NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、Caspase-1和Pro-IL-1β的表达水平明显升高,p62的表达水平明显降低(P<0.05)。

动脉粥样硬化动物模型,动物造模,小鼠模型,模型小鼠,心力衰竭模型,心肌梗塞模型,动物模型,动物实验

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  结论
  IDO表达缺失将增强巨噬细胞内自噬和NLRP3炎症小体的水平加重高尿酸血症-动脉粥样硬化小鼠的疾病进展。

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