摘要
　　HBV小鼠模型,小鼠模型,模型小鼠,动物模型,HBV模型,肝纤维化小鼠动物模型
　　乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一种存在于患者血液中，在肝组织中以共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA）为模板进行复制的一种全球广泛传播的病毒，可以引起急慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、甚至肝癌0-21。据统计全球每年患有慢性乙肝的患者有3亿人，死于HBV相关的肝炎患者有100万P+0。HBV感染所致肝纤维化动物模型对HBV的发病及治疗研究具有十分重要的意义。
　　HBV小鼠模型主要包括人源化肝小鼠、转基因小鼠、重组病毒载体转导的小鼠模型以及三种手段相结合的小鼠模型，目前这些模型已被广泛应用于乙肝病毒疾病及机制研究回。但是，上述模型的共同不足是均难以形成肝纤维化，成为HBV相关肝纤维化发病机制及其药物评价的瓶颈。
　　本课题前期通过高压水动力尾静脉注射人工合成的 cccDNA 到小鼠体内，仅对小鼠观察了 26 周，虽然 HBV 主要标志物均为阳性，但是却为发现小鼠肝纤维化。由于HBV所致肝病变是一个慢性感染过程，本实验以同样方法建立 HBY感染小鼠模型，持续观察到68周，除发现小鼠 HBY 标志物部分阳性外，最终出现了小鼠肝纤维化表型，甚至部分小鼠出现HBV基因突变所致的HBsAg阴性（HBsAgr）或 HBeAg 阴性（HBeAg）。此研究结果为肝纤维化药物评价及 HBsAg 或 HBeAg 转阴机制研究的模型建立提供理论基础。
　　目的
　　探索 HBV感染所致肝纤维化小鼠模型形成条件及表型分析。
　　方法
　　以CBA/CaJ小鼠为研究对象，按照每只2μg的剂量、通过高压水动力方法进行尾静脉注射cccDNA，转染68周后采样。通过 qPCR方法检测肝中HBV DNA及 HBV cccDNA，ELISA方法检测血清 HBsAg、HBeAg，免疫组化检测肝组织中HBsAg、HBcAg，用一代测序法检测HBeAg*/HBsAg-及 HBeAg/HBsAgt组织 DNA 基因测序，生化分析 ALT和 AST，HE染色、天狼星染色及Masson染色分析肝组织病理。
　　结果
　　实验组中（n=14），100%的小鼠 HBV-DNA拷贝数高于1000 copies/mL；小鼠肝组织 cccDNA 拷贝数显著高于空白组（P< 0.05）；42.9%的小鼠血清 HBsAg 和 HBeAg 呈阳性；60%的小鼠肝HBsAg呈阳性和26.7%的小鼠肝HBcAg呈阳性；HBeAg/HBsAg+样本中出现A1762T/G1764A和G1896A/G1899A位点突变，HBeAgt/HBsAgr样本出现前 S2区及 S区多位点突变；小鼠 ALT值异常率为57.1%，AST 值异常率为7.1%； HE 染色观察到所以实验组小鼠肝组织损伤及肝炎症浸润，天狼星染色、Masson染色观察到92.9%的肝组织发生纤维化。

　　结论
　　通过昆静脉高压水动力注射CBA/CaJ小鼠 HBY cocDNA 68周后，HBV主要标志物仍然阳性，HBV 感染可引起小鼠肝纤维化，甚至可模拟临床HBVBCP/PC基因突变表型。