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研究TGF-B/Smad信号通路在类风湿性关节炎间质性后肺纤维化小鼠模型中给药的作用

  • 分类:学术讲座
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  • 发布时间:2023-04-10 11:30
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【概要描述】(complete Freund's adjuvant,CFA)与鸡Ⅱ型胶原蛋白(chick-en Ⅱ collagen,Col-Ⅱ),构建RA小鼠动物模型。空白组给等量蒸馏水,对照组给等量冰醋酸(溶媒)。监测小鼠足趾肿胀程度(关节肿胀度与关节炎指数)评价小鼠建模情况;通过HE、Masson染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组化法观察肺间质细胞的胞质中TGF-β表达;采用化学发光法测量肺组织中羟脯氨酸水平;Western blot检测肺组织中 Smad2、Smad3及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达

研究TGF-B/Smad信号通路在类风湿性关节炎间质性后肺纤维化小鼠模型中给药的作用

【概要描述】(complete Freund's adjuvant,CFA)与鸡Ⅱ型胶原蛋白(chick-en Ⅱ collagen,Col-Ⅱ),构建RA小鼠动物模型。空白组给等量蒸馏水,对照组给等量冰醋酸(溶媒)。监测小鼠足趾肿胀程度(关节肿胀度与关节炎指数)评价小鼠建模情况;通过HE、Masson染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组化法观察肺间质细胞的胞质中TGF-β表达;采用化学发光法测量肺组织中羟脯氨酸水平;Western blot检测肺组织中 Smad2、Smad3及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达

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  摘要
  类风湿性关节炎小鼠模型,RA模型小鼠,动物模型,动物实验,动物造模构建,肺纤维化小鼠模型
  类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性和全身性炎症性疾病,影响着全球0.5%~1%的人口,对全球卫生资源的负担越来越大。其特征为对称性糜烂性滑膜炎和进行性残疾,常并发关节外表现,其中,肺部受累很常见,可包括从气道和胸膜疾病、支气管扩张症到间质性肺病(intersti-tial lung disease,ILD)等多种病变。
  ILD已被公认为RA的并发症,临床研究表明,约30%的肺部受累的RA患者会发展为RA相关的间质性肺病(RA-ILD),RA-ILD表现为肺实质的进行性纤维化。但是,RA-ILD肺纤维化的病因和发病机制,以及其死亡和发病率的原因几十年来一直未被充分认识。
  研究表明,成纤维细胞病灶中肌成纤维细胞的存在是肺纤维化的组织病理学标志之一,其由许多趋化因子诱导,最为常见的是TGF-B 。
  本研究拟通过动物实验建模RA-ILD,观察肺部纤维化改变,旨在探讨TGF-B/Smad信号通路在RA-ILD过程中的调节机制,为改善RA关节炎外肺纤维化、提高RA 患者的生活质量提供靶点和方向。
  目的
  研究TGF-B/Smad信号通路在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)相关的间质性后肺纤维化小鼠中通过小鼠尾根部皮下给药完全弗氏佐剂的作用。
  方法
  (complete Freund's adjuvant,CFA)与鸡Ⅱ型胶原蛋白(chick-en Ⅱ collagen,Col-Ⅱ),构建RA小鼠动物模型。空白组给等量蒸馏水,对照组给等量冰醋酸(溶媒)。监测小鼠足趾肿胀程度(关节肿胀度与关节炎指数)评价小鼠建模情况;通过HE、Masson染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组化法观察肺间质细胞的胞质中TGF-β表达;采用化学发光法测量肺组织中羟脯氨酸水平;Western blot检测肺组织中 Smad2、Smad3及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。
  结果
  与空白组、溶媒组相比,模型组小鼠关节肿胀、关节炎指数明显升高;给药21 d后,HE染色显示模型组肺间质有炎性改变,Masson染色显示模型组小鼠肺间质胶原纤维沉积,免疫组化染色显示模型组小鼠肺间质细胞的胞质中TGF-β表达升高,呈棕黄色;同时,与空白组、溶媒组相比,模型组肺组织匀浆显示羟脯氨酸表达明显升高;且进一步Western blot研究发现,与空白组、溶媒组相比,p-Smad2与p-Smad3在模型组中表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。

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  结论
  RA可导致肺组织纤维化,p-Smad2与p-Smad3表达上调,在肺纤维化和RA相关的间质性后肺纤维化中起重要作用。

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