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研究通过脂多糖LPS构建急性肺损伤动物模型观察敲除S1PR3和S1PR3激动剂对急性肺损伤的影响

  • 分类:学术讲座
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  • 发布时间:2023-04-28 10:54
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【概要描述】S1PR3在脓毒性急性肺损伤的具体机制尚不明确。因此,本研究通过脂多糖(LPS)构建急性肺损伤模型,观察了敲除S1PR3和S1PR3激动剂对急性肺损伤的影响,及是否通过MAPK通路发挥作用,为急性肺损伤的治疗提供一定的实验依据

研究通过脂多糖LPS构建急性肺损伤动物模型观察敲除S1PR3和S1PR3激动剂对急性肺损伤的影响

【概要描述】S1PR3在脓毒性急性肺损伤的具体机制尚不明确。因此,本研究通过脂多糖(LPS)构建急性肺损伤模型,观察了敲除S1PR3和S1PR3激动剂对急性肺损伤的影响,及是否通过MAPK通路发挥作用,为急性肺损伤的治疗提供一定的实验依据

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  摘要
  肺损伤模型,小鼠急性肺损伤模型,动物伤模型构建,小鼠模型,动物模型小鼠,动物实验
  脓毒症是病原微生物入侵机体后所致的全身炎症反应综合征。肺脏是脓毒症中受累的首位靶器官。在病程早期就可出现急性肺损伤,其发生率在危重病人群中高达7%。死亡率高达30%~40%,已成为脓毒症患者死亡的首要原因。鞘氨醇1磷酸酯受体3 (S1PR3)作为G蛋白偶联受体之一,与磷脂分子-1磷脂鞘氨醇结合,启动细胞跨膜信号转导,调节细胞增殖和炎症反应。S1PR3在全身各组织器官内高表达。有研究报道S1PR3是参与脓毒症过程巨噬细胞清除细菌的关键分子。当干扰S1PR3表达可抑制LPS诱导的小胶质细胞TNF-a、IL-6和IL-1β表达?。研究显示S1PR3在急性肺损伤中是关键的分子T101。
  S1PR3在脓毒性急性肺损伤的具体机制尚不明确。因此,本研究通过脂多糖(LPS)构建急性肺损伤动物模型,观察了敲除S1PR3和S1PR3激动剂对急性肺损伤的影响,及是否通过MAPK通路发挥作用,为急性肺损伤的治疗提供一定的实验依据。
  目的
  探讨敲除 S1PR3是否通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)途径改善脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤。
  方法
  用LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。雄性CS7BL/6I和SIPR3敲除小鼠,随机分为4组:CS7NS组C57.生理盐水处理)、C57 LPS组(C57,LPS诱导)、S1PR3NS组(S1PR3敲除鼠,生理盐水处理)、S1PR3LPS组(S1PR3敲除鼠,LPS诱导),8只/组。RT-qPCR检测S1PR3,IL-β和IL-18表达,HE染色检测肺部组织损伤i,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot法检测caspase-1,GSDMD,p-INK,p-ERK p-p38蛋白表达水平。同时,Ⅱ型肺泡上皮细胞(MLE-12细胞)铺板后分为4组:PBS组、LPS组、CYM5541组(仅加入SIPR3激动剂)、CYM5541+LPS组(加入SIPR3激动剂+LPS),检测各组细胞焦亡水平及MAPK信号通路分子的表达水平。
  结果
  急性肺损伤小鼠肺组织SIPR3表达上调(P<0.001);血清IL-1β和IL-18因急性肺损伤而明显升高(P<0.05)。急性肺损伤小鼠因敲除S1PR3肺出血、炎症渗出明显改善,肺湿干比重下降,细胞凋亡比例和焦亡相关蛋白如clv-caspase-1,GSDMD表达均降低(P<0.05)。MLE-12细胞因加入S1PR3激动剂,细胞焦亡相关蛋白表达均升高(P<0.05)。此外,MAPKs家族(INK,ERK p38)的激活因SIPR3敲除后受到抑制,因加入SIPR3激动剂而表达明显升高(P<0.05)。

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  结论
  敲除S1PR3可通过抑制MAPK信号通路改善急性肺损伤。

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