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探究脊髓损伤模型在小鼠骨髓中播散肿瘤细胞(disseminatedtumor cellsDTCs)的检测方法

  • 分类:学术讲座
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  • 来源:典藏逾1000+株细胞,供ATCC原装代购服务,临床前CRO服务,众多科研技术服务,定制各类疾病动物模型
  • 发布时间:2023-05-19 10:37
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【概要描述】采用慢病毒感染的方法构建MDA-MB-231-GEP/Luc乳腺癌细胞系,将MDA-MB-231-GEP/Luc 细胞经左心室接种干NOD-SCID小鼠体内,构建骨髓DTCs 小鼠模型。采用荧光定量RT-aPCR、流式细胞计数、骨组织连续切片免疫荧光染色三种检测方法对小鼠骨髓DTCs进行定量和组织学定位研究

探究脊髓损伤模型在小鼠骨髓中播散肿瘤细胞(disseminatedtumor cellsDTCs)的检测方法

【概要描述】采用慢病毒感染的方法构建MDA-MB-231-GEP/Luc乳腺癌细胞系,将MDA-MB-231-GEP/Luc 细胞经左心室接种干NOD-SCID小鼠体内,构建骨髓DTCs 小鼠模型。采用荧光定量RT-aPCR、流式细胞计数、骨组织连续切片免疫荧光染色三种检测方法对小鼠骨髓DTCs进行定量和组织学定位研究

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  摘要
  脊髓损伤模型,小鼠模型,模型小鼠,动物模型,动物实验
  乳腺癌患者易发生骨转移,晚期患者骨转移发生是乳腺癌研究领域的热点和难点[4-6]。本研究构建骨率高达70%~80%"。
  部分乳腺癌细胞在到达骨组织髓DTCs小鼠动物模型并进一步采用荧光定量RT-PCR时,即增殖并激活破骨细胞形成早期转移,而部分乳流式细胞计数和骨组织连续切片免疫荧光染鱼三种方腺癌细胞进入骨组织后不会立即生长,而是先以不活法检测小鼠骨髓中DTCs,并比较其用于乳腺癌骨转跃的骨髓播散肿瘤细胞(disseminated tumor cells移研究时的优点和缺点,从而为乳腺癌骨转移研究提DTCs)或“休眠”状态长期存在于骨髓中,待条件适官供方法学支持。
  目的
  探究小鼠骨髓中播散肿瘤细胞(disseminatedtumor cellsDTCs)的检测方法。
  方法
  采用慢病毒感染的方法构建MDA-MB-231-GEP/Luc乳腺癌细胞系,将MDA-MB-231-GEP/Luc 细胞经左心室接种干NOD-SCID小鼠体内,构建骨髓DTCs 小鼠模型。采用荧光定量RT-aPCR、流式细胞计数、骨组织连续切片免疫荧光染色三种检测方法对小鼠骨髓DTCs进行定量和组织学定位研究。
  结果
  荧光定量RT-qPCR法和流式细胞计数法的检测下限分别为22个和25个绿色荧光蛋白阳性(GEP)细胞骨组织连续切片免疫荧光染色法虽然不能定量骨髓DTCs数量,但可观察到GEPDTCs在骨组织中的分布,定位干成骨细胞或骨基质附近。

脊髓损伤模型,小鼠模型,模型小鼠,动物模型,动物实验

脊髓损伤模型,小鼠模型,模型小鼠,动物模型,动物实验
  结论
  三种检测方法联合使用可满足小鼠骨转移研究动物实验中骨髓DTCs的定量和定位研究的需求,可为乳腺癌骨转移和骨髓中休眠癌细胞研究提供方法学支持。

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