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观察过表达或沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长和发展的作用;建立肝癌原位动物模型和血行播散模型

  • 分类:学术讲座
  • 作者:【如需咨询购买细胞或技术服务,请点击24小时客服咨询或留言哦】
  • 来源:典藏逾1000+株细胞,供ATCC原装代购服务,临床前CRO服务,众多科研技术服务,定制各类疾病动物模型
  • 发布时间:2023-05-23 10:26
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【概要描述】随后使用荧光素酶基因慢病毒包装颗粒转染上述4种稳定转染细胞株。使用上述细胞株分别建立3种裸鼠肝癌模型:皮下移植瘤模型,原位移植瘤模型和血行播散模型;每种细胞株每一模型5只Balb-c裸鼠,共60只。建立皮下移植瘤模型,观测肿瘤的生长情况并绘制肝细胞肿瘤生长曲线;建立肝癌原位移植瘤和血行播散模型,采用生物发光活体成像技术及组织病理学方法监测造模成功率及肿瘤在肝内、肝外转移情况

观察过表达或沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长和发展的作用;建立肝癌原位动物模型和血行播散模型

【概要描述】随后使用荧光素酶基因慢病毒包装颗粒转染上述4种稳定转染细胞株。使用上述细胞株分别建立3种裸鼠肝癌模型:皮下移植瘤模型,原位移植瘤模型和血行播散模型;每种细胞株每一模型5只Balb-c裸鼠,共60只。建立皮下移植瘤模型,观测肿瘤的生长情况并绘制肝细胞肿瘤生长曲线;建立肝癌原位移植瘤和血行播散模型,采用生物发光活体成像技术及组织病理学方法监测造模成功率及肿瘤在肝内、肝外转移情况

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  摘要
  裸鼠肝癌模型,原位肝癌动物模型,动物造模,动物实验,小鼠模型,模型小鼠
  原发性肝癌(简称肝癌)是中国常见高发的恶性肿瘤之一,而肝癌细胞的血行播散侵袭转移是造成患者死亡的主要原因。肺转移是肝细胞癌最常见的血行转移器官,是肝癌研究的难点。
  新近研究表明,编码“肺归巢域”蛋白基因AEG-1(astrocyte ele-vated gene 1)在细胞恶性转化、肿瘤转移播散等方面发挥重要作用。我们的前期研究]发现高表达AEG-1的肝癌细胞更易向人肺微血管内皮细胞趋化,提示AEG-1可能与肝癌定向肺转移相关。
  为了证实AEG-1在肝癌中的作用,我们构建稳定过表达AEG-1肝癌细胞株SMMC-7721-AEG-1-L及过表达对照SMMC-7721-control-L,稳定沉默AEG-1肝癌细胞株SMMC-7721-shAEG-1-P及沉默对照SMMC-7721-control-P,并使用上述细胞株建立裸鼠肝癌动物模型;建立上述4种肝癌细胞株的皮下移植瘤裸鼠模型,观察过表达或沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长和发展的作用;建立肝癌原位移植瘤模型和血行播散模型,并用小动物活体成像系统进行监测,研究过表达或沉默AEG-1基因在肝癌定向肺转移中所起的作用。
  目的
  研究过表达和沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长的影响,以及AEG-1基因在调节肝癌细胞定向肺转移中的作用。
  方法
  分别以携带过表达AEG-1序列及对照基因序列的慢病毒(lentivirus)转染SMMC-7721肝癌细胞株(SMMC-7721-AEG-1-L;SMMC-7721-control-L);以携带shRNA AEG-1及对照shRNA质粒(plasmid)转染SMMC-7721细胞株(SMMC-7721-shAEG-1-P;SMMC-7721-control-P);使用实时定量PCR和Westen blot检测AEG-1的表达;随后使用荧光素酶基因慢病毒包装颗粒转染上述4种稳定转染细胞株。使用上述细胞株分别建立3种裸鼠肝癌模型:皮下移植瘤模型,原位移植瘤模型和血行播散模型;每种细胞株每一模型5只Balb-c裸鼠,共60只。建立皮下移植瘤模型,观测肿瘤的生长情况并绘制肝细胞肿瘤生长曲线;建立肝癌原位移植瘤和血行播散模型,采用生物发光活体成像技术及组织病理学方法监测造模成功率及肿瘤在肝内、肝外转移情况。
  结果
  通过肝癌皮下移植瘤模型可观察到AEG-1过表达组肿瘤体积显著高于对照组,且裸鼠肝脏组织出现弥漫性侵袭转移灶;在肝癌原位移植瘤和血行播散模型中可观察到AEG-1过表达/沉默可以导致肝癌细胞肝内转移、肺转移率和转移灶数量显著增高/降低。

裸鼠肝癌模型,原位肝癌动物模型,动物造模,动物实验,小鼠模型,模型小鼠

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  结论
  过表达AEG-1基因可促进肝癌细胞生长以及定向肺转移,沉默AEG-1基因抑制肝癌细胞生长及定向肺转移。

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