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探讨HIF-1α抑制剂对脓毒症动物模型相关性脑病(SAE)大鼠认知功能及神经细胞自噬的影响

  • 分类:学术讲座
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  • 发布时间:2023-05-25 16:58
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【概要描述】48只SPF级健康Wistar大鼠,随机分为空白组、假手术组、脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+HIF-1α特异性抑制剂(YC-1)组、SAE+YC-1组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导SAE大鼠模型,在行CLP术前24h经股静脉插管缓慢注射YC-1(10mg/kg溶解于二甲基亚砜)。CLP术后36h,进行新物体识别试验、悬尾试验、旷场试验,并取海马区脑组织标本,采用HE染色观察海马区脑组织病理变化,透射电镜观察神经细胞自噬变化,Western Blotting检测海马区脑组织Beclin-1、LC3-I、LC3-Ⅱ、HIF-1α蛋白表达

探讨HIF-1α抑制剂对脓毒症动物模型相关性脑病(SAE)大鼠认知功能及神经细胞自噬的影响

【概要描述】48只SPF级健康Wistar大鼠,随机分为空白组、假手术组、脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+HIF-1α特异性抑制剂(YC-1)组、SAE+YC-1组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导SAE大鼠模型,在行CLP术前24h经股静脉插管缓慢注射YC-1(10mg/kg溶解于二甲基亚砜)。CLP术后36h,进行新物体识别试验、悬尾试验、旷场试验,并取海马区脑组织标本,采用HE染色观察海马区脑组织病理变化,透射电镜观察神经细胞自噬变化,Western Blotting检测海马区脑组织Beclin-1、LC3-I、LC3-Ⅱ、HIF-1α蛋白表达

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  摘要
  脓毒症大鼠模型,动物模型,模型动物,动物造模,动物实验,模型大鼠
  脓毒症是一种全身性炎症反应综合征,与病理性感染同时发生[1-2]。脓毒症相关性脑病( sepsis -associated encephalopathy,SAE)以弥漫性脑功能障碍为特征,继发于脓毒症,不包括原发性中枢神经系统感染或其他类型的脑病,通常与预后不良有关。
  自噬是进化过程中溶酶体依赖的自我消化和细胞内循环的一种高度保守和广泛存在的机制,对维持细胞内平衡至关重要,自噬的自我保护机制发生在不利的环境中,与脓毒症的发生发展密切相关。
  缺氧诱导因子-1(hypoxic - inducible -factor-1,HIF-1)是哺乳动物中细胞对低氧反应的调节器,其介导的反应涉及多个基因的表达,是组织、细胞形成缺氧耐受共同的分子生物学机制,HIF-1α是其氧调节亚单位。研究表明HIF-1α通过与其靶基因结合并发挥其转录活性来促进恶性转化,而HIF -1α基因沉默后,脑损伤、脑水肿及凋亡细胞的数量能够被明显抑制。
  然而,HIF-1α在SAE病程中的作用目前尚未清晰。
  因此,本实验拟探讨HIF-1α抑制剂对SAE大鼠认知功能障碍、情绪异常、神经细胞自噬程度、自噬特异性标记物表达的影响,以期为SAE提供新的治疗策略及理论支撑。
  目的
  探讨HIF-1α抑制剂对脓毒症相关性脑病(SAE)大鼠认知功能及神经细胞自噬的影响。
  方法
  48只SPF级健康Wistar大鼠,随机分为空白组、假手术组、脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+HIF-1α特异性抑制剂(YC-1)组、SAE+YC-1组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导SAE大鼠动物模型,在行CLP术前24h经股静脉插管缓慢注射YC-1(10mg/kg溶解于二甲基亚砜)。CLP术后36h,进行新物体识别试验、悬尾试验、旷场试验,并取海马区脑组织标本,采用HE染色观察海马区脑组织病理变化,透射电镜观察神经细胞自噬变化,Western Blotting检测海马区脑组织Beclin-1、LC3-I、LC3-Ⅱ、HIF-1α蛋白表达。
  结果
  与空白组相比,脓毒症非SAE组、SAE组、脓毒症非SAE+YC-1组、SAE+YC-1组明显降低大鼠的记忆能力和探索能力,明显升高海马区脑组织Beclin-1蛋白表达及明显降低LC3-I蛋白表达(P<0.05),脓毒症非SAE组和SAE组海马区脑组织病理损伤明显。与SAE组比较,HIF-1α抑制剂处理可明显增加SAE大鼠接触次数,改善海马区脑组织病理变化,降低自噬相关蛋白Beclin -1、LC3-Ⅱ表达,升高LC3-I蛋白表达,但差异无统计学意义(P>0.05)。

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  结论
  HIF-1α抑制剂可明显改善SAE大鼠的认知功能障碍和情绪异常,改善海马区脑组织病理变化,缓解细胞自噬。

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