摘要
　　动物模型,骨关节炎模型,OA小鼠动物模型造模,动物实验,动物模型制备
　　骨关节炎( asteourhritis,OA)是一种最常见的退行性关节疾病，它会引起关节软骨退化和滑膜炎症等病理特征，导致疼痛、畸形甚至是功能丧失[1-。目前，它已成为全球导致疼痛、残疾和社会经济负担的主要因素。近年来，关于OA的治疗方式主要聚焦于缓解疼痛和抗炎，包括非药物(例如自我管理、般炼等)、药物(例如非甾体抗炎药和关节内注射皮质类固醇)和手术关节置换等田，尚无完全有效的药物可以阻止OA疾病的进展。
　　目前，用于OA疾病研究的模型有：(1)自发的与年龄相关的OA模型；(2)手术诱导的创伤后OA模型：如内侧半月板失稳动物模型( deubiliatiom of themedlidl menixuis, DMM).前交叉韧带截断模型(atsrior emcine ligament transection,ACLT)等；(3)胶原酶诱导的OA模型；(4)化学诱导的OA模型：例如用碘乙酸钠诱导OA模型四。目前，手术诱导是最常用的OA造模方式间。其中DMM模型多用于在基因敲除小鼠背景下评估特定基因对OA疾病进展及其严重程度的影响。例如，蛋白酶(ADAMTS-4,ADAMTS5)、细胞外基质受体(sgndeean?)、生长因子(成纤维细胞生长因子2)、细胞因子[白细胞介素-1(inerkukin-l,Ⅱ-4β)]和激素受体(黑色素皮质素1受体)等基因敲除的小鼠”。但DMM模型滑膜增生不明显，滑膜炎症较低，无法完全模拟临床上OA患者的病理特征。
　　现有模型大多以OA的某一特征为主导，针对发病机制或者疼痛，而今滑膜在0A中的作用越来越受到重视，因此具有滑膜炎症与滑膜增生特点的OA动物模型十分重要。也有研究者使用胶原诱导OA,但成模原理与OA临床患者的发病机制并不一致，胶原诱导的模型更适用于类风湿关节炎的研究，不适用OA这样的慢性退行性疾病。
　　已有文献证明，micmENA-204/-211基因与骨关节炎有关，mikemRNA204/-211基因敲除(miR-204/211-dKO)小鼠可形成自发且与年龄相关的OA[O,小鼠46周龄时具备明显OA表型。但这一模型的成功制备需消耗大量的饲养成本和时间成本，并不适合筛药等研究工作的进行。DMM手术促进了mi.cmRNA-204/211缺失引发OA的进程，因此我们提出将miR-204/211-dKO小鼠结合DMM构建OA模型，观察micemaRNA-204/211敲除对DMM所致骨关节炎小鼠的影响，我们的研究发现小鼠短期出现了明显的滑膜增生，miR-204/-211-dKO小鼠结合DMM减少了饲养成本与时间成本，遵循实验动物3R原则，在研究中替换和完善动物的使用。
　　目的
　　观察microRNA-204/-211敲除对内侧半月板失稳术(destabilization of the medial meniscus,DMM)所致骨关节炎(osteoarthritis,OA)小鼠的影响。
　　方法
　　使用12只C57BL/6J(WT)小鼠和12只microRNA-204/-211基因敲除(miR-204/-211-dKO)小鼠，WT小鼠随机分为假手术组和DMM组，即WT-control组和WT+DMM组；miR-204/-211-dKO小鼠随机分为假手术组和DMM组，即dKO组和dKO+DMM组。WT+DMM组和dKO+DMM组行DMM。VonFrey法测定小鼠对疼痛的敏感性。3个月后取材，膝关节行微计算机断层扫描(Micro-CT)检测、组织染色以及免疫组化分析，RT-qPCR检测DRG组织中相关疼痛和炎症因子。
　　结果
　　与WT-control组小鼠相比，WT+DMM组小鼠出现骨赘形成、软骨下骨硬化、疼痛阈值下降等典型OA症状，软骨中Ⅱ型胶原的表达降低、MMP13的表达升高，DRG中炎症因子以及疼痛相关因子的表达明显升高。
　　与此同时，miR-204/-211 dK0+DMM小鼠较WT+DMM小鼠OA症状更加明显，说明miR-204/-211敲除加重了DMM所致小鼠OA。值得注意的是，单纯DMM手术未造成WT小鼠明显的滑膜增生和滑膜炎症，无法完全模拟临床上OA患者的病理特征，而miR-204/-211敲除明显促进DMM小鼠膝关节的滑膜增生和滑膜炎症。

　　结论
　　miR-204/-211敲除小鼠行DMM手术后，不仅出现典型OA特征，而且出现滑膜增生和滑膜炎症，能更好得模拟临床OA患者的病理特征，可作为新的OA模型和筛选抗OA药物的理想动物模型。