细胞功能学平台

服务概述

　　吉妮欧生物细胞功能学平台服务主要包括稳转株构建、细胞增殖（CCK8、MTT、EDU、克隆形成）/细胞毒性检测、细胞凋亡（Tunel、AnnexinV FITC）、细胞周期、细胞迁移与侵袭、JC-1、成脂诱导、成管实验、双荧光素酶报告基因系统、磁珠分选免疫细胞分型检测、流式细胞鉴定、激光共聚焦检测荧光表达、原代细胞分离等项目。
　　实验项目重复性好，技术专业，服务体系完善，为客户的科学研究保驾护航。

服务内容

1功能学实验项目
　　1.1软琼脂克隆形成检测
　　采用软琼脂克隆形成的方法，检测肿瘤细胞的克隆形成能力，常用于判断肿瘤细胞增殖情况或细胞治疗产品中肿瘤细胞的残留情况。
　　1.2 细胞增殖/细胞毒性
　　1、细胞增殖实验包括了CCK8、MTT、EDU、CTG、克隆形成实验，可对体外细胞进行活力检测；
　　2、细胞毒性检测包括CCK8、MTT、CTG检测；
　　1.3 细胞迁移与侵袭
　　通过transwell实验检测细胞侵袭或迁移能力，通过woundhealing实验检测细胞迁移能力。
　　1.4 流式细胞术
　　1、细胞凋亡（AnnexinV FITC/PI）
　　2、细胞周期（PI法）
　　3、细胞表型鉴定
　　4、免疫细胞分型
　　5、平均荧光强度分析
　　6、ROS活性氧检测
　　7、AM/PI活死率检测
　　8、JC-1线粒体膜电位转移检测
　　1.5 磁珠分选与表达鉴定
　　提取PBMC进行磁珠分选检测免疫细胞表达情况。
　　1.6 干细胞诱导
　　细胞成骨诱导与成脂诱导，检测干细胞诱导分化能力。
　　1.7 细胞成管能力检测
　　检测不同条件干预下的细胞成管率。
　　1.8 双荧光素酶报告基因
　　1.9 其他功能学实验
　　特殊方案或其他没有介绍的实验，可咨询我司相关技术人员。
2 细胞株构建
　　2.1 原代细胞分离与培养
　　原代细胞分离技术包括：大脑皮层与小脑神经元分离培养、脊椎背根神经节DRG分离与培养、肾小管上皮细胞分离与培养、间充质干细胞分离与培养、CD4+/CD8 +T细胞分离、小鼠肝癌细胞分离与培养等。
　　2.2 稳转株构建
　　稳转株是指通过基因编辑获得稳定过表达或抑制特定基因的细胞株。采用慢病毒药筛系统“慢病毒感染——药物筛选法”or通过转座子筛选系统进行稳转细胞株的构建，包括构建过表达稳转株、敲低稳转株或疾病相关基因稳转株。
　　2.3 耐药株构建
　　通过大剂量药物冲击法、药物浓度递增法、药物浓度递增与大剂量药物冲击相结合法等方法学构建耐药细胞株。
　　2.4 Cas9基因编辑细胞株构建
　　CRISPR/Cas9系统由一个单链向导RNA（small guide RNA, sgRNA）和一个具有核酸内切酶功能的Cas9 蛋白组成，其技术原理包括sgRNA引导的Cas9靶向DNA切割和DNA修复两个基本过程。CRISPR/Cas9技术的优势是能永久性地改变基因组DNA的序列，并且可以在不编码的DNA区域进行编辑，可以多个位置同时进行编辑。
　　通过Cas9基因编辑技术，对目的基因进行敲除构建的细胞株可用于基因功能研究、疾病模型构建、基因治疗等方面，具有广阔的应用前景。
3 细胞实验仪器检测
　　3.1 酶标仪检测OD值
　　通过不同的激发波长，对OD值进行检测。
　　3.2 化学发光仪检测自发光
　　可检测ATP、荧光素酶等化学发光。灵敏度高，检测速度快。
　　3.3 荧光显微镜检测荧光表达
　　通过镜下观察细胞荧光表达情况。
　　3.4 活体成像仪检测荧光稳转株构建
　　通过活体成像仪记录细胞荧光值，直观快速。
　　3.5 LSM800激光共聚焦检测荧光表达
　　通过LSM800进行激光共聚焦，高清晰、荧光定位精准。
　　3.6 BD流式细胞仪
　　通过BD流式细胞仪，4通道检测细胞荧光。

服务流程

1、客户提供资料
　　根据客户方案、诉求或我司提供建议对方案进一步完善后，进行相关实验的开展。
2、实验开展周期

3、交付实验数据
　　3.1、报告：实验结束后，进行数据与图片整理，涉及到分析统计的数据会在报告中列出，以报告形式提交。
　　3.2、图片：原始数据整理打包；
　　3.3、实物交付：涉及到实物的实验样本，在实验结束后，汇总打包；
4、接收反馈
　　实验结束后，客户在实验流程、实验操作、实验结果上有疑问的地方，我司协助解答，必要情况下进行技术指导。

服务优势

　　1、一站式服务
　　我司细胞库有800株以上细胞株，资源种子齐全。提供产品全流程服务，省事省心；
　　2 、技术成熟
　　服务的科研院校、企业单位遍布全国，从事技术实验的同事拥有10年以上经验；
　　3、时间保证
　　对于每项实验的完成周期，有完善的实验管控体系和反馈体系（VR小程序进度记录），可以做到反馈及时与高效完成。
　　4、提供专业技术指导
　　有专业的服务团队，提供专业实验技术建议与指导，为相关科学研究保驾护航；

代表案例