cas9基因编辑细胞


服务概述

CRISPR/Cas9系统由一个单链向导RNA(small guide RNA, sgRNA)和一个具有核酸内切酶功能的Cas9 蛋白组成,其技术原理包括sgRNA引导的Cas9靶向DNA切割和DNA修复两个基本过程。CRISPR/Cas9技术的优势是能永久性地改变基因组DNA的序列,并且可以在不编码的DNA区域进行编辑,可以多个位置同时进行编辑。
通过Cas9基因编辑技术,对目的基因进行敲除构建的细胞株可用于基因功能研究、疾病模型构建、基因治疗等方面,具有广阔的应用前景。

服务内容

构建Cas9基因编辑细胞株。

服务流程

  • 1、sgRNA设计与载体构建
    包括靶基因分析、靶点设计与载体构建;
    2、sgRNA筛选与CAS9/gRNA及同源重组单链donor转染293细胞
    3、单克隆细胞株筛选
    观察转染荧光率,96孔板极限稀释,24h到48h标记单克隆(GFP or RED荧光细胞),扩培后进行下一步检测;
    4、PCR检测及测序验证
    提取基因DNA,PCR扩增敲除靶点附近的基因组序列,并通过测序鉴定阳性敲除克隆。
    5、目的细胞扩培与保种
    6、交付实物
    目的基因敲除细胞的单克隆细胞系:1到2*10^6个cells。

  • Cas9基因编辑细胞株流程示意图

服务优势

  • 1、一站式服务
    提供一站式CRISPR/Cas9基因敲除及点突变细胞株构建服务,省事省心;
    2、质量保障
    保证细胞株无支原体衣原体感染;
    3、技术指导
    提供专业培养和Cas9技术指导;
    4、售后无忧
    发货细胞2周无责售后,无后顾之忧;KO细胞为客户长期保存。